| 摘 要： | 目的探讨胃癌细胞miR-100表达及其对ZBTB7A基因的调控作用。方法使用人胃癌细胞株SGC-7901(低分化、转移)和BGC-823(低分化),将实验细胞分为SGC-7901miR-100组、SGC-7901miR-100抑制剂组、SGC-7901Si-阴性对照组、SGC-7901Si-ZBTB7A组、BGC-823miR-100组、BGC-823 miR-100抑制剂组、BGC-823 Si-阴性对照组及BGC-823 Si-ZBTB7A组。定量PCR法检测各组miR-100及ZBTB7A m RNA的表达,免疫印迹法检测ZBTB7A蛋白表达水平,细胞迁移与体外侵袭实验测定体外细胞迁移和侵袭能力,通过质粒构建及双荧光素酶报告基因检测ZBTB7A 3′UTR载体相关的荧光素酶的活性情况。结果荧光素酶报告基因检测显示,在miR-100过度表达的SGC7901和BGC823细胞中,与荧光素酶活性相关的ZBTB7A 3′UTR载体显著减少,分别为(46.4±1.9)%和(55.7±2.3)%;miR-100被敲除时,ZBTB7A 3′UTR载体相关的荧光素酶的活性上调,分别为(32.7±1.9)%和(25.4±3.3)%。蛋白免疫印迹法显示,过表达的miR-100导致SGC7901和BGC823细胞中ZBTB7A表达的蛋白水平分别降低(81.8±3.8)%和(62.9±1.3)%;当miR-100被敲除时,ZBTB7A的蛋白水平分别上调(38.1±2.7)%和(46.5±3.4)%。结论ZBTB7A是miR-100的靶基因,miR-100表达可以下调ZBTB7A的表达,从而抑制胃癌细胞的转移和生长。
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