独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞(FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用SD大鼠制备独活寄生汤含药血清,弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎,分离提取原代滑膜成纤维细胞。滑膜成纤维细胞分为6组,分别是空白组、模型组、甲氨喋呤组、独活寄生汤高、中、低剂量组,每组5个复孔,分别加入相应的药物。CCK8法检测各组细胞增殖率;荧光定量PCR和ELISA分别检测细胞Bax、Bcl-2、caspase3 m RNA和蛋白水平的表达变化。结果:空白组细胞在各时间点未见明显的变化;模型组细胞随时间延长,增殖抑制率升高(P0.05);甲氨喋呤组和独活寄生汤高、中、低剂量组细胞随干预时间的延长,增殖抑制率降低(P0.05)。与空白组比较,模型组细胞在各时间点的增殖抑制率均升高(P0.05);与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤各剂量组细胞在各时间点的增殖抑制率均降低(P0.05),尤以高剂量组的抑制率更为明显。与空白组比较,模型组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平降低,Bcl-2 m RNA和蛋白水平升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤中、高剂量组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平升高,Bcl-2 m RNA和蛋白水平降低(P0.05,P0.01),高剂量组的作用更为明显。结论:独活寄生汤能抑制佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的增殖,其作用机制与下调抗凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax和caspase3的表达有关。

Medicated Serum of Duhuo Jisheng Tang Has Effect on Proliferation and Apoptosis of Fibroblast-like synoviocytes in Rats with Adjuvant-incluced Arthritis