运载LC3质粒的PEI纳米粒载体的构建

目的制备聚乙烯亚胺-三聚磷酸钠(PEI-TPP)纳米粒作为基因载体,并优化条件,获得高效转载表达质粒GFP-LC3(自噬标志性蛋白)的新型纳米粒基因载体。方法以阴离子凝聚交联法制备PEI-TPP纳米粒,通过静电吸附作用连接上质粒GFP-LC3;经琼脂糖凝胶电泳分析载体与DNA结合能力,并将其转染到常见细胞系观察其转染效率及细胞毒性。结果成功制备均匀分散、平均粒径为100 nm的PEI-TPP纳米粒。琼脂糖凝胶电泳的结果显示PEI-TPP纳米粒能有效地结合GFP-LC3。PEI-TPP纳米载体可以有效地转运LC3质粒进入Hela细胞并稳定表达。在常见细胞系中PEI-TPP纳米粒转染率比单一PEI转染高1.6~4.3倍,且细胞存活率达90%以上。结论 PEI-TPP纳米粒可有效结合并转染GFP-LC3质粒,呈现低毒和高效性,对研究细胞自噬的转染提供新的方法。