木香内酯诱导人脑星形胶质母细胞瘤细胞凋亡

目的] 探究木香内酯诱导人脑星形胶质母细胞瘤细胞凋亡的作用机制。方法] 通过 CCK8 法检测木香内酯对 U87 细胞增殖作用的影响； 采用 Annexin V-FITC/PI 双染法检测木香内酯对 U87 细胞凋亡率的影响， 采用 JC-1染色法检测木香内酯对 U87 细胞线粒体膜电位的影响； 采用 DCFH-DA 探针检测木香内酯对 U87 细胞中 ROS 含量的影响；采用生化法检测木香内酯对 U87 细胞氧化应激指标丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、微量还原型谷胱甘肽（GSH）和一氧化氮（NO）含量的影响； 采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测木香内酯对U87 细胞 Caspase-3、Bax、Bcl-2 的 mRNA 表达水平的影响； 采用分子对接寻找木香内酯与 Caspase-3、Bax、Bcl-2 的具体结合位点。结果] 木香内酯呈剂量依赖性抑制 U87 细胞的生长， 细胞半抑制浓度 IC₅₀ 为 11.27 μmol/L；细胞凋亡水平检测结果显示木香内酯 20 μmol/L 组 U87 细胞凋亡率增加， 差异具有统计学意义（P<0.001）； 线粒体膜电位水平检测结果显示木香内酯 5 μmol/L 组、10 μmol/L 组、20 μmol/L 组 U87 细胞线粒体膜电位降低， 差异具有统计学意义（P<0.001）；氧化应激检测水平显示， 木香内酯呈剂量依赖性上调 U87 细胞中 ROS、MDA、NO 水平； 下调 SOD、GSH 水平， 差异具有统计学意义（P<0.05）； 木香内酯 20 μmol/L 组 U87 细胞 Caspase-3、Bax mRNA 表达水平均上调， 差异具有统计学意义（P<0.01）， 而 Bcl-2 mRNA 表达水平下调， 差异具有统计学意义（P<0.05）。分子对接结果显示木香内酯分别与 Caspase-3、Bcl-2、Bax 氨基酸残基 ARG-164， LEU-168， ARG-66 形成稳定的结合能。结论] 木香内酯能明显抑制 U87 细胞生长和介导细胞高氧化应激水平， 降低线粒体膜电位并促进细胞凋亡。

Effect of micheliolide on apoptosis of human astrocytoma cells