| 人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ原核核表达系统的构建及单克隆抗体的制备 |
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| 作者姓名： | 侯俊 张健 郭静霞 陈霖 赵静 刘佳 徐军 刘爱霞 宋永继 |
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| 作者单位： | 1. 解放军医学院/解放军总医院, 北京,100853
2. 解放军第三○二医院肝纤维化中心
3. 解放军第三○二医院临检中心 |
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| 基金项目： | 解放军第三○二医院重点课题(项目编号：YNKT2011010) |
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| 摘 要： | 目的 制备针对人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ (TIMP-Ⅰ)融合蛋白的单克隆抗体.方法 用逆转录聚合酶链反应法从纤维化的肝组织中扩增TIMP-Ⅰ编码序列,产物克隆入pQE31载体,转化大肠埃希菌BL21,诱导表达后通过6×His标签进行纯化,用纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备单克隆抗体,并进行鉴定.结果 成功构建了TIMP-Ⅰ原核表达体系,并获得了重组蛋白.筛选出4株能稳定分泌抗TIMP-Ⅰ的单克隆抗体杂交瘤细胞株,免疫球蛋白类型有3株为IgGl类.Western Blot印迹显示这些单抗能特异结合TIMP-1蛋白.结论 成功构建了人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ原核表达体系,并获得了单克隆抗体.
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| 关 键 词： | 间质胶原酶 克隆,分子 抗体,单克隆 |
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