| 人高致病性H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 蒋培余,黄惠莲,周洪昌,徐伯赢,顾福萍,闵丽姗,钟婧,戴利成.人高致病性H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定[J].中华实验和临床病毒学杂志,2013,27(2):138-140. |
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| 作者姓名： | 蒋培余 黄惠莲 周洪昌 徐伯赢 顾福萍 闵丽姗 钟婧 戴利成 |
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| 作者单位： | 313000 浙江省湖州市,湖州师范学院医学院,湖州市分子医学重点实验室 |
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| 基金项目： | 浙江省湖州市一般科技计划项目(项目编号：2009YS15) |
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| 摘 要： | 目的 制备高灵敏度和高特异性的人高致病性H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白抗体并对其效价进行初步评估.方法 构建含有H5N1亚型禽流感病毒NS1序列的pET-28a(+)重组载体的大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达NS1蛋白,并经Ni-NTA色谱柱亲和层析纯化获得NS1重组蛋白,并进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定.以纯化的蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,获得兔抗NS1血清,亲和纯化获得多克隆抗体.应用ELISA和Western Blot检测纯化抗体的效价和特异性.结果 NS1融合蛋白得到高表达,且纯度＞90％,用该融合蛋白免疫新西兰大白兔后得到的抗NS1多克隆抗体,效价达1∶80 000,并特异性识别H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白.结论 获得了NS1多克隆抗体,具有较好的效价和特异性.
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| 关 键 词： | 流感 序列分析 蛋白质 抗体 病毒 克隆 分子 |
Preparation and characterization the polyclonal antibody of the nonstructural protein of human highly pathogenic H5N1 avian influenza viruses |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Influenza Sequence analysis protein Antibodes 1viral Cloning molecular |
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