| 人乳头瘤病毒6bL1双顺反子载体的构建及其在哺乳动物细胞内的表达 |
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| 引用本文： | 邓列华,殷董,胡云峰,田静,计雄飞,范洪涛,郭秀枝,林泽,赵永铿.人乳头瘤病毒6bL1双顺反子载体的构建及其在哺乳动物细胞内的表达[J].中华皮肤科杂志,2011,44(1):347-349. |
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| 作者姓名： | 邓列华 殷董 胡云峰 田静 计雄飞 范洪涛 郭秀枝 林泽 赵永铿 |
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| 作者单位： | 暨南大学附属第一医院皮肤科,广州,510630;陕西省人民医院皮肤科;广州市天河区慢性病防治中心皮肤性病科;福建医科大学附属第一医院皮肤科;Medical Department of Johnson,Radnor PA USA; |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金暨南大学自然科学基金团队项目 |
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| 摘 要： | 目的构建尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒6b型晚期基因(HPV6b L1)的双顺反子表达载体,并使其在哺乳动物细胞内表达,以期建立含有HPV6b L1的细胞模型.方法表达质粒pEGFP-HPV6bL1经双酶切纯化后与经过相同双酶切的真核表达质粒pIRES2-EGFP连接,酶切鉴定,挑选阳性克隆进行测序.重组质粒pIRES2-HPV6bL1-EGFP转染进小鼠成纤维细胞(NIH3T3),荧光显微镜下观察EGFP蛋白的表达.RT-PCR检测HPV6b L1 mRNA的生成.结果成功构建含HPV6b L1的重组质粒pIRES2-HPV6bL1-EGFP.重组体成功转染进NIH3T3细胞,并用G418筛选.同时荧光倒置显微镜下可观察到细胞内有绿色荧光蛋白的表达.进一步进行RT-PCR,检测到HPV6b L1 mRNA的生成.结论成功构建携带HPV6b L1的重组体pIRES2-HPV6bL1-EGFP并转染入NIH3T3细胞.经荧光倒置显微镜观察及RT-PCR方法检测证明HPV6b L1在NIH3T3细胞内成功表达.
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Construction of a bicistronic expression vector containing human papillomavirus (HPV) type 6b L1 gene and its expression in mammalian cells |
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| DENG Lie-hua,YIN Dong,HU Yun-feng,TIAN Jing,JI Xiong-fei,FAN Hong-tao,GUO Xiu-zhi,LIN Ze,ZHAO Yong-keng.Construction of a bicistronic expression vector containing human papillomavirus (HPV) type 6b L1 gene and its expression in mammalian cells[J].Chinese Journal of Dermatology,2011,44(1):347-349. |
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| Authors: | DENG Lie-hua YIN Dong HU Yun-feng TIAN Jing JI Xiong-fei FAN Hong-tao GUO Xiu-zhi LIN Ze ZHAO Yong-keng |
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