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聚合酶链反应-单链构象多态性用于耐利福平结核分支杆菌rpoB基因突变的研究
作者姓名:何秀云  庄玉辉  李国利  吴雪琼  张晓刚
作者单位:北京解放军第三○九医院结核病研究室
摘    要:目的研究结核分支杆菌rpoB基因突变及其与利福平(RFP)耐药性的关系。方法以参考菌株结核分支杆菌H37Rv为对照,用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法分析了40株结核分支杆菌临床分离株。PCR-SSCP方法由PCR扩增和扩增产物DNA单链多态性分析组成。结果两对引物PCR扩增产物分别为411和258bp,其敏感性分别为5pg/μl、500个菌/ml和1pg/μl、500个菌/ml;均为属特异性。40株结核分支杆菌临床分离株258bp扩增片段SSCP图谱的特点:以参考菌株结核分支杆菌H37Rv为对照,10株敏感株均无区别;单耐RFP或包括RFP多种抗结核药30株,除3株外,其余27株SSCP图谱有明显的区别;检测阳性率为90%,特异性为100%。结论PCR-SSCP方法可检测出耐RFP结核分支杆菌rpoB基因突变;该基因是RFP的药物靶编码基因,它的突变与RFP耐药性有密切关系,这有助于结核分支杆菌耐药性的快速检测和研究

关 键 词:利福平  分支杆菌.结核  药物耐受性  聚合酶链反应  多态现象.单链构象
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