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| 单核细胞趋化因子1发卡环RNA真核表达载体的构建 | |
| 引用本文： | 张雪松,马胜忠,王岩,侯铁胜. 单核细胞趋化因子1发卡环RNA真核表达载体的构建[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2006, 10(28): 94-96 |
| 作者姓名： | 张雪松 马胜忠 王岩 侯铁胜 |
| 作者单位： | 1. 解放军总医院骨科,北京市,100853 2. 解放军济南军区总医院骨科,山东省,济南市,250031 3. 解放军第二军医大学长海医院骨科,上海市,200433 |
| 摘 要： | 目的:构建单核细胞趋化因子1发卡环RNA真核表达载体。方法:实验于2002-10/2003-05在解放军第二军医大学中心实验室完成。①单核细胞趋化因子1发卡小分子干扰RNA片段合成。②将发卡小分子干扰RNA克隆入质粒pSilencer产生重组质粒SiRNA-pSilencer-单核细胞趋化因子1。③分别用BamHⅠ和HindⅢ酶切鉴定,随机分为1,2样本,每份样本进行10次电泳,并且采用460bpi标准参照样。④将经酶切鉴定后的重组质粒作测序分析。结果:①单核细胞趋化因子1发卡小分子干扰RNA片段被成功克隆进pSilencer-U6质粒中。②BamHⅠ和HindⅢ酶切鉴定可切出450bpi大小的片段,结果表明样本1,2均与参照以及marker相一致,从片段大小的角度初步确定酶切的准确。③DNA测序分析显示,重组质粒小分子干扰RNA编码序列与设计片段的序列完全一致。结论:针对单核细胞趋化因子1发卡小分子干扰RNA片段的真核表达载体SiRNA-pSilencer-单核细胞趋化因子1的成功构建,为进一步研究其基因功能打下了基础。 |
| 关 键 词： | RNA 小分子干扰 单核细胞化学吸引蛋白质1 遗传载体 质粒 |
| 文章编号： | 1671-5926(2006)28-0094-03 |
| 修稿时间： | 2006-04-20 |
Construction of eukaryotic expression vector of monocyte chemoattactant peptide-1 small interfering RNA |
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| Zhang Xue-song,Ma Sheng-zhong,Wang Yan,Hou Tie-sheng. Construction of eukaryotic expression vector of monocyte chemoattactant peptide-1 small interfering RNA[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2006, 10(28): 94-96 | |
| Authors: | Zhang Xue-song Ma Sheng-zhong Wang Yan Hou Tie-sheng |
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