鼠诺如病毒在新生小鼠坏死性小肠结肠炎模型中的保护作用

目的 探讨鼠诺如病毒(murine norovirus,MNV)在新生小鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)模型中的作用,并分析其可能的作用机制.方法 将75只新生1d的C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为3组(n=25):正常对照组、给予PBS的NEC模型组(PBS+NEC组)和给予MNV干预的NEC模型组(MNV+ NEC组).正常对照组与母鼠同笼,不予任何处理;其余两组进行NEC动物模型构建.新生小鼠于生后1d给予联合抗生素,连续灌胃10 d模拟无菌后,行NEC建模3d,建模前后固定时间点称量体质量,第14天处死小鼠,HE染色观察回盲部肠组织病理学变化;qPCR法检测TLR-3、MDA-5、IL-6、IL-10、IL-1β、IL-22基因表达水平;流式细胞仪检测3型天然淋巴样细胞(type 3 innate lymphoid cells,ILC3)数量;ELISA法检测肠组织匀浆IL-10水平.结果 与正常对照组相比,PBS+ NEC组、MNV+NEC组小鼠体质量明显降低(P＜0.01),肠道损伤明显.与PBS+ NEC组相比,MNV+ NEC组体质量下降较少(P＜0.05),肠上皮损伤也较轻;而在mRNA表达水平上,TLR-3(0.73 ±0.26 vs 0.62 ±0.40,P＞0.05)、MDA-5(0.98 ±0.35 vs 0.67 ±0.39,P＞0.05)、IL-10(1.22±0.36 vs0.60 ±0.31,P＜0.01)、IL-22(1.20 ±0.38 vs 0.65 ±0.22,P＜0.05)基因表达增高,IL-6 (0.75±0.33 vs 1.22 ±0.34,P＜0.05)、IL-1β(0.39 ±0.2 vs 1.25 ±0.59,P＜0.01)炎症因子基因表达降低;IL-10水平显著升高(165.55 ±53.51) pg/mL vs (129.59 ±26.22) pg/mL,P＜0.05],ILC3数量差异无统计学意义(12.88±1.45)％ vs(12.80 ±0.76)％,P＞0.05],但其分泌的IL-22表达升高.结论 MNV在新生小鼠NEC模型肠道损伤中起保护作用,可能与MNV下调炎症因子IL-6、IL-1β,上调抑炎因子IL-10及分泌IL-22的ILC3的功能有关.

Protective effect of murine norovirus on neonatal mouse model of necrotizing enterocolitis