| 小鼠PGC-1α基因启动子的转录调控功能分析 |
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| 作者姓名： | 冉莉 涂晶 肖新华 钟警 洪涛 文格波 |
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| 作者单位： | 1.南华大学附属第一医院内分泌科,湖南 衡阳,421001;2.南华大学附属第一医院临床研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然基金项目（30900707）. |
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| 摘 要： | 目的 克隆小鼠PGC-1α基因的启动子并分析其转录调控模式.方法 设计引物,以小鼠肝脏组织DNA 为模板,PCR扩增PGC-1α基因启动子区并克隆入荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Basic 中,构建具有PGC-1α启动子转录活性的报告质粒pGL3-PGC-1α-Luc.通过特异性引物,引入替换碱基突变相关转录因子调控模序,构建点突变融合载体,并将其转染1c1c7 及c2c12 细胞系,检测荧光素酶的表达情况.结果 构建的pGL3-PGC-1α-Luc 系列报告质粒经过酶切鉴定及DNA 测序分析都显示正确;PGC-1α基因启动子区域（-2533~＋78）具有较强的转录活性;突变失活PGC-1α基因启动子区域中的CRE及IRE反应原件导致转录活性明显降低.结论 成功构建小鼠PGC-1α基因启动子报告质粒,PGC-1α基因上游区域（-2533~＋78）具有较强的启动子活性;启动子区域中的CRE和IRE反应原件为主要转录调控位点.
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| 关 键 词： | PGC-1α 启动子 转录调控 小鼠 肝脏 |
| 收稿时间： | 2013-08-27 |
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