| 殊异韦荣菌中乳酸脱氢酶重组蛋白的表达、纯化及活性分析 |
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| 引用本文： | 何钟勤,钟丞,高心,薛莹,孙晓宇,刘晓红. 殊异韦荣菌中乳酸脱氢酶重组蛋白的表达、纯化及活性分析[J]. 中华口腔医学杂志, 2012, 47(Z1) |
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| 作者姓名： | 何钟勤 钟丞 高心 薛莹 孙晓宇 刘晓红 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学中日联谊医院口腔科,长春,130033
2. 吉林大学口腔医学院牙体牙髓科,长春,130021 |
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| 摘 要： | 目的 进一步测定殊异韦荣菌中依赖性乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性,以期为研究该酶的具体功能及作用机制奠定基础,并为龋病预防和治疗提供新的思路.方法 重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3)中,采用不同时间及6种不同浓度的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyhhio-β-D-galactoside,IPTG)诱导乳酸脱氢酶蛋白表达,选择最佳条件诱导LDH蛋白表达.并经His-标记蛋白纯化柱(HisTRAP FF柱)提纯,用LDH活性试剂盒测定蛋白活性.结果 pET-28a-LDH转入BL21(DE3)和Rosetta(DE3)中十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示最适表达条件分别为IPTG终浓度0.4 mmol/L、30℃诱导8h,IPTG终浓度0.4 mmol/L、30 ℃诱导6h.经BandScan 5.0软件分析,pET-28a-LDH质粒转化BL21(DE3)表达相对含量为9.0％,高于Rosetta(DE3)的6.1％；LDH活性试剂盒测定的蛋白活性值为13.79.结论 本项研究获得了LDH蛋白的最适诱导条件,并测出殊异韦荣菌中依赖性LDH的活性,为进一步研究LDH的功能及在龋病防治中的作用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 韦荣球菌属 乳酸脱氢酶类 重组表达 蛋白纯化 |
The recombinant expression, purification and activity analysis of lactate dehydrogenase in Veillonella dispar |
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| HE Zhong-qin , ZHONG Cheng , GAO Xin , XUE Ying , SUN Xiao-yu , LIU Xiao-hong. The recombinant expression, purification and activity analysis of lactate dehydrogenase in Veillonella dispar[J]. Chinese journal of stomatology, 2012, 47(Z1) |
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| Authors: | HE Zhong-qin ZHONG Cheng GAO Xin XUE Ying SUN Xiao-yu LIU Xiao-hong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Veillonella Lactate dehydrogenases Preliminary expression Protein activity |
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