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在inside-out膜片上caffeine对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的调节作用及ryanodine的影响
引用本文:仲维高,杨艳,曾晓荣,崔跃,孔天翰. 在inside-out膜片上caffeine对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的调节作用及ryanodine的影响[J]. 中国病理生理杂志, 2010, 26(1): 53-58. DOI: 1000-4718
作者姓名:仲维高  杨艳  曾晓荣  崔跃  孔天翰
作者单位:1广州医学院蛇毒所, 广东 广州 510183; 2中山大学疼痛研究中心, 广东 广州 510080;3 泸州医学院心血管医学研究所, 四川 泸州 646000
基金项目:国家自然科学基金资助项目 
摘    要:目的:利用膜片钳技术,研究咖啡因对钙激活钾通道(calcium-activated potassium channel,KCa)的作用机制,及咖啡因存在时兰尼定(ryanodine)对KCa的影响以阐明冠状动脉平滑肌的调控机制。方法:采用急性酶分离方法,应用膜片钳单通道电流记录技术记录猪冠状动脉平滑肌钿胞上KCa电流活动。电流信号经放大、滤波及A/D、D/A转换后输入微机进行采样和储存。应用PCLAMP9.0软件系统进行数据采集及分析。结果:在内面向外式(inside-out)膜片下,咖啡因(0.1、0.5、1.0、5.0mmol/L)可浓度依赖性地增加通道开放概率,而对电流幅值无明显影响,开放概率增加是通过明显缩短平均关闭时间实现的(n=8,P0.01);洗去药物后通道活性可以恢复到对照水平;5.0mmol/L咖啡因对KCa激活作用最大(P0.01)。在细胞贴附式(cell-attached)膜片上,咖啡因激活KCa后,ryanodine(10-40μmol/L)浓度依赖性地抑制通道开放概率,开放时间缩短,关闭时间延长,对电流幅度无明显影响。结论:在inside-out膜片下,咖啡因能够直接激活猪冠状动脉平滑肌细胞KCa通道。在cell-atta-ched构型上,ryanodine可通过胞内一定的信号通路浓度依赖性间接抑制咖啡因对KCa激活。

关 键 词:咖啡因  钾通道  钙激活  Inside-out膜片  兰尼定  猪冠状动脉平滑肌细胞  Cell-attached膜片  
收稿时间:2009-04-16
修稿时间:2009-09-16

Effects of caffeine and ryanodine on KCa in porcine coronary artery smooth muscle cells
ZHONG Wei-gao,YANG Yan,ZENG Xiao-rong,CUI Yue,KONG Tian-han. Effects of caffeine and ryanodine on KCa in porcine coronary artery smooth muscle cells[J]. Chinese Journal of Pathophysiology, 2010, 26(1): 53-58. DOI: 1000-4718
Authors:ZHONG Wei-gao  YANG Yan  ZENG Xiao-rong  CUI Yue  KONG Tian-han
Affiliation:1Institute of Snake Venom, Guangzhou Medical College, Guangzhou 510183, China; 2
Pain Research Center, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080, China; 3Institute of Myocardial Electrophysiology, Luzhou Medical College, Luzhou 646000, China. E-mail: zhongweigao01@163.com
Abstract:AIM:To study the effect of caffeine on the large conductance calcium activated potassium (KCa) channels by patch-clamp technique on smooth muscle cells enzymatically isolated from the porcine coronary artery (PCASMC),and to investigate the effect of ryanodine on KCa being activated by caffeine.METHODS:Using the single channel patch-clamp technique,single PCASMC was isolated by collagenase,the activity of single KCa channel was recorded in porcine coronary artery smooth muscle cells.RESULTS:Caffeine (0.1-10 ...
Keywords:Caffeine  Potassium channels  calcium-activated  Inside-out patches  Ryanodine  Porcine coronary artery smooth muscle cells  Cell-attached patches
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