| 转录因子Sp1 siRNA表达质粒的构建及对Huh-7肝癌细胞增殖的作用 |
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| 引用本文： | 李宁,杨丽娟,周翡,李琦,高勇,王理伟.转录因子Sp1 siRNA表达质粒的构建及对Huh-7肝癌细胞增殖的作用[J].肿瘤,2009,29(6). |
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| 作者姓名： | 李宁 杨丽娟 周翡 李琦 高勇 王理伟 |
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| 作者单位： | 1. 同济大学附属东方医院肿瘤科,上海,200120
2. 上海交通大学附属第一人民医院肿瘤科,上海,200080 |
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| 基金项目： | 1.上海市浦江人才计划项目，2.上海市科学技术委员会资助项目，3.上海市浦东新区卫生系统重点学科项目 |
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| 摘 要： | 目的:通过转录因子Sp1的siRNA表达质粒作用于Huh-7肝癌细胞动物模型,探讨Sp1在肝癌细胞增殖方面的作用.方法:构建靶向抑制Sp1基因的siRNA表达质粒,转染表达有绿色荧光蛋白的肝癌Huh-7细胞,筛选稳定表达的siRNA转染克隆;Western印迹法检测Sp1的表达变化,CCK8法和裸鼠皮下成瘤实验分别检测转染后Huh-7细胞在体内及体外的增殖情况.结果:Sp1-siRNA表达质粒特异性抑制Huh-7细胞Sp1的表达,筛选后得到稳定的Sp1-siRNA细胞克隆,其细胞增殖能力明显降低(P<0.05).裸鼠皮下成瘤实验显示,质粒转染细胞接种21 d时Sp1-siRNA细胞种植瘤平均体积为(82.40±8.61)mm3,明显小于对照组的(160.00±20.27)mm3.结论:Sp1对Huh-7肝癌细胞具有重要的调控作用,siRNA抑制Sp1表达后可在体内外抑制Huh-7肝癌细胞增殖.
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| 关 键 词： | 癌 肝细胞 Sp1转录因子 RNA 小干扰 细胞增殖 模型 动物 |
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