干预G蛋白βγ亚基介导的信号转导途径对心肌细胞肥大的影响

目的 研究G蛋白βγ亚基在心肌细胞肥大中的作用.方法 采用细菌内同源重组方法制备重组腺病毒载体rAd-βARKct 50 MOI(multiplicity of infection)感染经去甲肾上腺素处理肥大乳鼠心肌细胞,荧光倒置显微镜下观察心肌细胞形态及绿色荧光蛋白的表达,EMAIL图像分析软件测定心肌细胞的表面积,RT-PCR检测βARKct、α-MHC和β-MHC的mRNA表达水平.结果 经测序鉴定证实rAd-β ARKct构建成功,对心肌细胞的感染率40%～50%,与去甲肾上腺素组相比,重组腺病毒组α-MHC定量比值显著上升,β-MHC定量比值显著降低.结论 编码βARKct的重组腺病毒表达载体可以体外感染乳鼠心肌细胞并在心肌细胞中表达βARKct;抑制Gβγ蛋白的功能,可显著逆转去甲肾上腺素介导的肌球蛋白重链表型的改变(α-MHC/β-MHC),逆转心肌细胞肥大.