| 嗜人按蚊rDNA-ITS2基因的克隆鉴定及SNP分析 |
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| 引用本文： | 耿艺介,黄达娜,高世同,庾蕾,黄继莲,张仁利.嗜人按蚊rDNA-ITS2基因的克隆鉴定及SNP分析[J].热带医学杂志,2007,7(1):38-41. |
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| 作者姓名： | 耿艺介 黄达娜 高世同 庾蕾 黄继莲 张仁利 |
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| 作者单位： | 深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室,深圳,518020;深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室,深圳,518020;深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室,深圳,518020;深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室,深圳,518020;深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室,深圳,518020;深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室,深圳,518020 |
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| 摘 要： | 目的克隆和分析嗜人按蚊核糖体DNA（rDNA）第2内转录间隔区（ITS2）序列，研究嗜人按蚊rDNA-ITS2序列的种属特异性及不同个体rDNA-ITS2序列的单核苷酸多态性（Single Nuclear Polymorphism，SNP）。方法用DNA提取试剂盒从嗜人按蚊中提取DNA摸板，利用蚊虫5．8s和28S序列的保守性设计特异引物进行聚合酶链反应以扩增嗜人按蚊rDNA-ITS2基因，扩增产物经回收纯化后连接到TA载体，经amp^＋LB固体平板筛选的阳性克隆。经amp^＋LB液体培养基培养后进行PCR鉴定、EcoRI酶切鉴定和序列分析。结果经PCR反应扩增出全长556bp的嗜人按蚊rDNA-ITS2基因。纯化后重组克隆经PCB鉴定可重现556bp的特异性条带，其酶切产物亦与目的基因PCR产物位置相同。嗜人按蚊6个克隆的同一性为99．6％，其rDNA-ITS2基因单核苷酸存在颠换和插入，在556的范围内有一个A→T，一个G→T的颠换；一个T的插入。结论嗜人按蚊rDNA-ITS2序列在种间高度保守，但不同个体间也存在一定的SNP多态性。
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| 关 键 词： | 嗜人按蚊 rDNA第2内转录间隔区 聚合酶链反应 单核苷酸多态性 |
| 文章编号： | 1672-3619（2007）01-0038-04 |
| 收稿时间： | 2006-10-09 |
| 修稿时间： | 2006-11-19 |
Cloning and SNP Analysis of rDNA-ITS2 of Anopheles anthropophagus |
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| GENG Yi-jie,HUANG Da-na,GAO Shi-tong,YU Lei,HUANG Ji-lian,ZHANG Ren-li.Cloning and SNP Analysis of rDNA-ITS2 of Anopheles anthropophagus[J].Journal Of Tropical Medicine,2007,7(1):38-41. |
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| Authors: | GENG Yi-jie HUANG Da-na GAO Shi-tong YU Lei HUANG Ji-lian ZHANG Ren-li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Anopheles anthropophagus rDNA-ITS2 PCR SNP |
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