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在大肠杆菌中融合表达重组羧肽酶抑制剂
引用本文:许大洲,王树英,金坚,李华钟.在大肠杆菌中融合表达重组羧肽酶抑制剂[J].中国脊柱脊髓杂志,2006(6).
作者姓名:许大洲  王树英  金坚  李华钟
作者单位:[1]江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214036 [2]江南大学分析测试中心,江苏无锡214036 [3]江南大学医学系,江苏无锡214063
摘    要:利用PCR技术扩增得到编码土豆羧肽酶抑制剂(carboxypeptidase inhibitor from potato,CPI)活性多肽基因,克隆于表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点中,得到重组质粒pGCPI,测序后将重组质粒转化到受体菌Escherichia coli BL21中。重组菌经IPTG诱导表迭,超声波破菌后,通过谷胱甘肽sepheroseFF亲和层析柱一步纯化得到融合蛋白,纯度大于979,6。融合蛋白经凝血酶切割并分离除去谷胱甘肽-S-转移酶后得到纯度大于98%的重组CPI,ELISA鉴定产物具有免疫原性,体外检测表明其促进纤溶的生物功能与天然CPI无明显差异。

关 键 词:重组  土豆羧肽酶抑制剂  融合表达  纤溶

Fusion Expression of Recombinant Carboxypeptidase Inhibitor in Escherichia coli
XU Da-zhou,WANG Shu-ying,JIN Jian,LI Hua-zhong.Fusion Expression of Recombinant Carboxypeptidase Inhibitor in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Spine and Spinal Cord,2006(6).
Authors:XU Da-zhou  WANG Shu-ying  JIN Jian  LI Hua-zhong
Abstract:The gene encoding potato carboxypeptidase inhibitor was amplified by polymerase chain reaction,and cloned into PGEX-4T-1 vector.The recombinant expression plasmid pGCPI was sequenced and was transformed to Escherichia coli BL21.reCPI-GST fusion protein ex
Keywords:recombinant  carboxypeptidase inhibitor  fusion expresion  fibrinolysis
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