hif-1α基因沉默对宫颈癌HeLa细胞增殖及对顺铂敏感度的影响

目的研究靶向干扰hif-1α基因表达后，对HeLa细胞增殖及其对顺铂敏感度的影响。方法构建针对hif-1α基因的干扰载体并转染HeLa细胞，G418筛选阳性克隆，经RT-PCR与Western blot鉴定抑制效果，用MTT法观察抑制hif 1α基因表达后，HeLa细胞增殖的变化，RT-PCR检测在低氧培养条件下HeLa/shRNA-i细胞葡萄糖转运蛋白1 mRNA的水平，利用MTT法观察抑制hif-1α表达后HeLa细胞对顺铂敏感性的改变。结果HeLa/shRNA-i细胞与对照细胞组相比，hif-1α基因mRNA表达降低了62%，蛋白表达明显降低，MTT显示细胞吸光度值降低，低氧条件下葡萄糖转运蛋白1 mRNA表达降低，对顺铂药物的敏感度增高，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论hif-1α基因的沉默可以抑制HeLa细胞的增殖并且能够增强HeLa细胞对顺铂的敏感度。