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VEGF-C基因靶向RNA干扰重组表达载体的构建和表达
引用本文:周慧聪,亢春彦,张艳,李继昌. VEGF-C基因靶向RNA干扰重组表达载体的构建和表达[J]. 世界华人消化杂志, 2007, 15(13): 1549-1553
作者姓名:周慧聪  亢春彦  张艳  李继昌
作者单位:郑州大学第一附属医院消化内科,河南省郑州市,450052;河南省职工医学院病理教研室,河南省郑州市,450052;郑州大学基础医学院药理教研室,河南省郑州市,450052
摘    要:目的:利用质粒pSilencer3.1-H_1构建针对人血管内皮生长因子-C(VEGF-c)基因的表达载体,测序鉴定并观察在胃癌细胞中的表达.方法:根据质粒pSilencer3.1-H_1要求设计两对小干扰RNA靶序列,退火形成互补的双链,通过与线性化的pSilencer3.0-H_1相应位点连接、转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,酶切电泳及测序鉴定后转染胃癌细胞株SGC-7901,Western blot检测转染前后VEGF-C基因的蛋白表达.结果:经酶切和测序鉴定,针对VEGF-C基因的siRNA表达载体构建成功.转染胃癌细胞株SGC-7901后,Western blot检测显示VEGF-C基因蛋白表达明显降低,pSilencer3.1-VEGF-C1组抑制效果明显,其抑制率为81.2%,与阴性对照组相比差异具有显著性(P<0.05).结论:成功构建了针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体和稳定转染的胃癌细胞株SGC-7901.

关 键 词:胃癌  血管内皮生长因子-C  重组质粒  RNA干扰
收稿时间:2006-11-28
修稿时间:2006-11-28

Construction and expression of small interfering RNA vector targeting on vascular endothelial growth factor-C
Hui-Cong Zhou,Chun-Yan Kang,Yan Zhang,Ji-Chang Li. Construction and expression of small interfering RNA vector targeting on vascular endothelial growth factor-C[J]. World Chinese Journal of Digestology, 2007, 15(13): 1549-1553
Authors:Hui-Cong Zhou  Chun-Yan Kang  Yan Zhang  Ji-Chang Li
Abstract:
Keywords:Gastric cancer  Vascular endothelial growth factor-C  Recombinant plasmid  RNA interference  Western blot
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