运用同一波长HPLC法测定大鼠血清色氨酸及其代谢产物

目的:运用高效液相色谱-紫外检测法建立一种简单、快速同时测定大鼠血清中的色氨酸(Trp)及主要代谢产物5-羟色胺(5-HT)和犬尿氨酸(Kyn)的检测方法。方法:以20%高氯酸为血清蛋白质沉淀剂,采用C18(250×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.05mol/l磷酸二氢钾-甲醇(80∶20,v/v),于波长225nm处对大鼠血清进行检测。结果:15min内可以完成本实验分析过程,大鼠血清中Trp、5-HT、Kyn平均回收率分别为90.69%、103.21%、101.15%,RSD分别为1.78%、0.81%、1.12%(n=9);分别在0μg~27.0336μg、0μg~1.47456μg、0μg~1.51552μg的范围内成较好的线性关系,相关系数r均为0.9995。结论:通过对实验中多个环节的考察,建立了大鼠血清中色氨酸及其代谢产物5-羟色胺与犬尿氨酸含量测定的方法,该方法准确性较好,能快速简单地完成检测过程。

Determination Of Serum Tryptophan And its Metabolites In Rats with HPLC Method