亚低温抑制大鼠弥漫性脑损伤后细胞凋亡的研究

目的：探讨大鼠不同程度弥漫性脑损伤后脑组织的凋亡变化过程及亚低温治疗对脑细胞凋亡的抑制作用。方法：采用大鼠Marmarou颅脑创伤装置制作弥漫性脑损伤模型，然后将128只Wistar大鼠分为未损伤组（对照组）、重度损伤组、轻度损伤组和亚低温治疗组。通过电子显微镜、组织切片原位末端标记DNA片段（TUNEL染色）、琼脂糖凝胶电泳（DNA Ladder法）等方法，观察和比较不同程度脑损伤后，大鼠脑皮层及海马区凋亡细胞的形态、特点和数量。结果：（1）损伤后24-48h，皮层及海马区可见大量细胞皱缩、核碎裂、核不规则等细胞凋亡现象，48h较24h更为严重；亚低温治疗后24-48h，电子显微镜观察皮层及海马区未见细胞皱缩、核碎裂等细胞凋亡现象。（2）TUNEL染色结果显示，随着损伤程度的加重凋亡明显加重，损伤后48h达高峰，然后逐渐下降。轻度损伤组细胞凋亡主要限于海马CA2和CA3区；重度脑损伤组细胞凋亡涉及整个海马结构，同时还广泛累及额顶区皮质。损伤后第24、48、72h，皮层及海马区的凋亡细胞数量较同期未治疗组明显减少。（3）重度损伤后48h，海马和皮层区细胞琼脂糖电泳可见典型的DNA梯状带，其他时间未见梯状带。亚低温治疗组、轻度脑损伤组及未损伤组亦未见梯状带。结论：轻度弥漫性脑损伤后，脑细胞凋亡多发生于海马CA2和CA3区；重度脑损伤后皮层及海马区细胞可发生广泛凋亡。细胞调亡随着损伤程度的加重而加重，高峰位于伤后第2d。亚低温治疗可有效地抑制大鼠弥漫性脑损伤的细胞凋亡。