HIF-1α反义寡核苷酸对喉鳞状细胞癌hep-2细胞放疗的增效作用

目的：通过HIF-1α反义寡核苷酸转染hep-2细胞株，观察细胞凋亡及对放疗的反应情况。方法：体外培养人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株，脂质体介导反义寡核苷酸转染，6h后4Gy7射线照射。低氧培养24h后RT—PCR检测HIF-1α mRNA表达，流式细胞仪检测HIF-1α蛋白水平及细胞凋亡率，MTT检测细胞存活情况。结果：低氧使人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株对放射的敏感性下降；低氧并未影响HIF-1αmRNA的表达，HIF-1α蛋白在低氧6h时表达已开始升高，低氧36h时达高峰，之后表达逐渐下降；放射刺激对HIF-1α蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）；各浓度的反义寡核苷酸转染组降低HIF-1α的转录及蛋白水平；MTT结果显示随反义核苷酸浓度增高，其增殖抑制效应越强（P〈0．05），正义对照核苷酸及脂质体对照没有显著的抑制效应（P〉0、05），但转染浓度在400nmol／L以上时，正义对照也表现出一定的增殖抑制作用（P〈0．05）；放疗后反义寡核苷酸转染组蛋白表达下降明显，较对照组及单纯放射组细胞凋亡率增加（P〈0．01）。结论：低氧环境下人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株对放射有抵抗作用，这种抵抗作用与低氧时HIF-1α蛋白表达上调有关，而放射本身并未上调HF-1α蛋白的表达；HIF-1α反义寡核苷酸转染hep-2细胞株能够降低HIF-1α蛋白表达，提高低氧环境下人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株对放疗的敏感性。