| 通过基因突变提高噬菌体蛋白Ⅷ介导的抗体Fab段的展示 |
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| 引用本文： | 刘晓琳,张达矜,化冰,张海荣,王琰. 通过基因突变提高噬菌体蛋白Ⅷ介导的抗体Fab段的展示[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2002, 22(6): 591-594 |
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| 作者姓名： | 刘晓琳 张达矜 化冰 张海荣 王琰 |
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| 作者单位： | 100037,北京,解放军海军总医院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (3 0 0 70 70 6) |
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| 摘 要： | 目的 构建基因Ⅷ变种文库 ,筛选表面展示效率高的突变体 ,改进抗体分子在噬菌体表面的呈现效果。方法 通过重叠PCR ,在基因Ⅷ引入随机突变 ,克隆到抗乙肝表面抗原 (HBsAg)的噬菌体抗体表达载体中 ,使抗HBsAg的Fab段通过蛋白Ⅷ展示于噬菌体表面 ,构建蛋白变种Ⅷ文库 ,筛选能使HBsAg表面呈现效果得到提高的蛋白Ⅷ突变体。结果 构建了一个库容为 6× 10 8的基因Ⅷ变种文库 ,使用游离抗原竞争、硫氰酸盐洗涤等方法进行淘筛 ,获得多个展示活性高于野生型蛋白Ⅷ的突变体 ,其中 2个最好的变种可使表面呈现效果提高 5 0～ 70倍。结论 通过对基因Ⅷ的改造可提高其对抗体Fab段的展示性能 ,获得 2株可使展示活性提高 5 0～ 70倍的基因Ⅷ突变体
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| 关 键 词： | 基因突变 噬菌体表面展示 蛋白Ⅷ 噬菌体抗体 |
| 修稿时间： | 2002-04-19 |
Improvment the pⅧ mediated phage display of Fab by mutation of geneⅧ |
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| LIU Xiaolin,ZHANG Dajin,HUA Bing,ZHANG Hairong,WANG Yan. Navy General Hospital,Beijing ,China. Improvment the pⅧ mediated phage display of Fab by mutation of geneⅧ[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2002, 22(6): 591-594 |
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| Authors: | LIU Xiaolin ZHANG Dajin HUA Bing ZHANG Hairong WANG Yan. Navy General Hospital Beijing China |
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| Affiliation: | LIU Xiaolin,ZHANG Dajin,HUA Bing,ZHANG Hairong,WANG Yan. Navy General Hospital,Beijing 100037,China |
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