| IRE1α重组腺病毒载体对ATDC5软骨干细胞增殖及凋亡的影响 |
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| 作者姓名： | 李祥柱 张鹏 韩晓凤 李美玲 夏飞 郭风劲 |
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| 作者单位： | 1. 重庆市璧山县人民医院输血科
2. 400016,重庆 重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部新世纪优秀人才支持计划，重庆市高等学校优秀人才支持计划，the National Natural Science Foundation of China，the New Century Excellent Talent Support Project of Education Ministry of China，the University Excellent Talent Support Project of CQEC |
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| 摘 要： | 目的 构建重组人IRE1α腺病毒,观察其对软骨干细胞ATDC5增殖与凋亡的影响.方法 应用pAdEasyTM腺病毒载体系统构建包含全长IRE1α基因和RNase+Kinase核心结构域的重组穿梭质粒pAdTrack-IRE1α、pAdTrack-R+K,通过电转法分别与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组,获得重组腺病毒pAd-IRE1α、pAd-R+K.随后在HEK-293细胞中包装并扩增重组腺病毒颗粒Ad-IRE1α、Ad-R+K.用直接PCR法鉴定重组腺病毒,后者体外感染软骨干细胞ATDC5,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)感染效率,并应用流式细胞仪分别检测在内质网应激(ERS)和非ERS状态时重组腺病毒对ATDC5细胞增殖和凋亡的影响.结果 酶切鉴定和PCR证实成功构建了重组腺病毒质粒pAd-IRE1α、pAd-R+K.流式细胞仪检测结果显示,在ERS状态时,重组腺病毒质粒Ad-IRE1α、Ad-R+K感染后ATDC5细胞G1期比例明显降低,S期细胞比例明显升高(P＜0.05),细胞凋亡率明显增高(P＜0.05).结论 含IRE1α基因的重组腺病毒感染可促进ATDC5细胞的增殖和凋亡.
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| 关 键 词： | IRE1α 腺病毒科 ATDC5细胞 细胞增殖 细胞凋亡 |
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