| 接触式细胞共培养诱导人脐带华通胶间充质干细胞向类髓核细胞分化 |
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| 引用本文： | 张 燕,阮狄克,张 超,王德利,李海峰,吴剑宏,刘 玥,王超峰,何 勍. 接触式细胞共培养诱导人脐带华通胶间充质干细胞向类髓核细胞分化[J]. 中国脊柱脊髓杂志, 2012, 22(10): 936-942 |
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| 作者姓名： | 张 燕 阮狄克 张 超 王德利 李海峰 吴剑宏 刘 玥 王超峰 何 勍 |
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| 作者单位： | 中山大学孙逸仙纪念医院骨科 中山大学脊髓损伤研究所 广东省脊柱脊髓疾病科研中心 510120 广州市;中山大学孙逸仙纪念医院骨科 中山大学脊髓损伤研究所 广东省脊柱脊髓疾病科研中心 510120 广州市;中山大学孙逸仙纪念医院骨科 中山大学脊髓损伤研究所 广东省脊柱脊髓疾病科研中心 510120 广州市 |
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| 摘 要： | 目的:观察接触式细胞共培养条件下,人髓核细胞对脐带华通胶间充质干细胞(Wharton′s jelly-derived mesenchymal stem cells,WJMSCs)的诱导分化效应,为椎间盘退变性疾病的治疗寻找种子细胞来源。方法:取足月产健康新生儿脐带约30cm,分离、纯化、培养WJMSCs;取人椎间盘髓核组织,酶消化法分离培养髓核细胞。取第三代稳定增殖的WJMSCs,利用流式细胞方法检测细胞免疫表型CD73/CD90/CD105/CD34/CD45/HLA-ABC/HLA-DR。用羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记WJMSCs,与髓核细胞以1∶1比例进行混合,在6孔板中进行接触式细胞共培养;以单独培养的WJMSCs为对照组。培养7d后利用高速流式细胞仪分选荧光标记阳性的WJMSCs,提取细胞总RNA,进行反转录获得cDNA,利用Real-Time PCR方法检测其Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Ⅵ型胶原、蛋白多糖、SOX-9和多能聚糖基因的相对表达,管家基因GAPDH作为内参,单独培养的WJMSCs作为对照,利用2-ΔΔCt方法计算基因相对表达变化。结果:WJMSCs原代细胞接种24h可见部分细胞贴壁生长,形态为梭形和多角形,1周后形成集落,2周时细胞融合达到90%。流式细胞检测结果显示CD73/CD90/CD105/和HLA-ABC(+),CD34/CD45和HLA-DR(-)。与髓核细胞共培养7d后WJMSCs的Ⅱ型胶原、蛋白多糖和SOX-9基因相对表达较对照组显著性增加(P<0.01),Ⅰ型胶原、Ⅵ型胶原和多能聚糖基因相对表达未见显著性变化(P>0.05)。结论:通过接触式细胞共培养人脐带WJMSCs能够被髓核细胞诱导分化为类髓核细胞,可为组织工程技术和细胞治疗修复退变椎间盘提供种子细胞来源。
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| 关 键 词： | 华通胶间充质干细胞 共培养 诱导分化 髓核细胞 |
| 收稿时间： | 2012-06-26 |
| 修稿时间： | 2012-08-13 |
Efficacy of posterior en bloc spondylectomy for metastatic epidural spinal cord compression |
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| ZHANG Yan,RUAN Dike,ZHANG Chao. Efficacy of posterior en bloc spondylectomy for metastatic epidural spinal cord compression[J]. Chinese Journal of Spine and Spinal Cord, 2012, 22(10): 936-942 |
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| Authors: | ZHANG Yan RUAN Dike ZHANG Chao |
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| Affiliation: | Department of Orthopedics, Sun Yat-sen Memorial Hospital of Sun Yat-sen University; Institute of Spinal Cord Injury, Sun Yat-sen University; Research Center for Spine & Spinal Disease, Guangzhou, 510120, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Total en bloc spondylectomy Metastatic epidural spinal cord compression Neoplasm metastasis Treatment outcome |
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