| 副溶血弧菌tlh基因克隆载体和表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 李志峰,聂军. 副溶血弧菌tlh基因克隆载体和表达载体的构建[J]. 中国公共卫生, 2003, 19(4): 418-419 |
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| 作者姓名： | 李志峰 聂军 |
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| 作者单位： | 第一军医大学流行病教研室,广州,510515 |
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| 摘 要： | 目的：构建含副溶血弧菌（vibrio parahaemolyticus,VP)tlh基因克隆载体和表达载体，检测并鉴定表达载体在转化菌的表达，为制备单抗、诊断试剂及进一步深入研究不耐热性溶血毒素（TLH）的功能奠定基础。方法：根据Genbank的tlh全基因序列，设计一对附加EcorV和HindⅢ两个限制性内切酶酶切位点的特异性引物，以VP基因组DNA为模板，用高保真Taq酶扩增出tlh基因。连接pGEM-T载体构建克隆载体，测序鉴定后，再用EcorV和HindⅢ酶切回收目的基因并克隆至表达载体pET32 ,采用PCR和双酶切鉴定筛选阳性质粒，转化DE3，IPTG诱导，用SDS－PAGE检测tlh的表达。结果：扩增的目的基因与GenBank的tlh比较具有99％的同源性，重组表达载体转化DE3，能表达融合蛋白。结论：本研究成功扩增出完整的tlh基因，构建了克隆载体和表达载体，获得融合表达的目的蛋白。
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| 关 键 词： | 副溶血弧菌 tlh基因 PCR 克隆载体 表达载体 |
| 文章编号： | 1001-0580(2003)04-0418-02 |
| 修稿时间： | 2002-05-27 |
Construction of clone and expression vector of gene of vibrio parahaemolyticus |
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| LI Zhi feng,NIE Jun. Construction of clone and expression vector of gene of vibrio parahaemolyticus[J]. Chinese Journal of Public Health, 2003, 19(4): 418-419 |
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| Authors: | LI Zhi feng NIE Jun |
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| Affiliation: | LI Zhi feng,NIE Jun.Department of Epidemiology of the First Medical Military University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | VP tlh PCR clone vector expression vector |
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