重组转化因子β_1的表达及修复骨缺损的研究

目的　运用基因重组的方法 ,对人TGF β1的进行基因克隆 ,在大肠杆菌中表达 ,并进行重组TGF β1修复骨缺损的实验研究。方法　以pBV2 2 0 作为原核细胞表达载体 ,将TGF β1cDNA片段定向重组到pBV2 2 0 的多克隆位点上 ,构建原核细胞表达质粒pTGF β1并转化至大肠杆菌中进行温度诱导表达。在兔顶骨两侧各制造直径为 10mm的骨缺损 ,左侧缺损植入纤维蛋白加重组TGF β110 0ug作为实验组 ,右侧缺损单纯植入纤维蛋白作为对照组 ,术后进行组织学和平均灰重测定。结果　表达产物经SDS PAGE分析 ,该表达体系可高效表达TGF β1,其表达产物占菌体可溶性蛋白的 2 3% ,用NRK细胞检测本研究生产的TGF β1具有该蛋白的野生活性。实验组缺损区组织学及平均灰重明显优于对照组 (P <0 0 5 )。结论　TGF β1原核表达体系的建立为TGF β1的生产提供了高效的表达工程菌 ,重组TGF β1能有效地修复骨缺损