| 小鼠轻型肠型放射病肠上皮细胞差异表达基因的筛选研究 |
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| 引用本文： | 胡川闽,粟永萍,程天民,王军平,刘贤华,王晓东,冉新泽. 小鼠轻型肠型放射病肠上皮细胞差异表达基因的筛选研究[J]. 第三军医大学学报, 2002, 24(6): 705-708 |
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| 作者姓名： | 胡川闽 粟永萍 程天民 王军平 刘贤华 王晓东 冉新泽 |
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| 作者单位： | 1. 第三军医大学,预防医学系防原医学教研室、全军复合伤研究所,重庆,400038
2. 第三军医大学,附属西南医院病理学研究所,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( 39770 2 37)，国家教育部高等学校骨干教师资助计划资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 筛选经辐射诱导后小鼠肠上皮细胞的差异或特异表达基因。方法 通过基因库检索和计算机分析，设计出较通用的5’端武断引物在基因库中其呈现几率要高出数倍到数十倍的4条5′端高同源mRNA差示引物，应用DDRT-PCR，测序凝胶电泳，放射自显影，分子杂交等方法，分析并筛选小鼠受12Gyγ射线全身照射后3h(R1组）和96h(R2组）肠上皮细胞差异或特异表达基因。结果 5′端高同源性引物mRNA差异结果显示，与正常比较，小鼠全身12Gy照射后不同时相的肠上皮细胞基因表达存在差异，从近8000条PCR扩增产物中，比较筛选出12个差异表达基因片段，RNA-blot杂交对11个辐射损伤情况下差异表达基因片段进行了鉴定，R1S1和R1S2差异基因片段在辐射损伤后3h的肠上皮细胞中呈特异性表达；R2S2和R2S5基因片段在辐射损伤后96h的肠上皮细胞中呈特异性表达，R2S1，R2S6和R2S8基因片段是假阳性差异表达基因片段；而R2S1，R2S4及R2S8用RNA-blot法检测不到表达，序列分析结果显示R1S1和R2S2在基因库中未见高同源的基因序列，与R1S1同源性最高（60.00%)的是一个源于大鼠输卵管特异性糖蛋白基因，R2S5与一种小鼠肌细胞钙离子信号传导分子有67.21%的同源性；R2S2高度同源于鼠源性肿瘤诱导蛋白p32(91.52%)；R1S2在基因库中未检测到同源基因，结论 证实高同源引物具有良好的代表性和呈现几率，并筛选和鉴定出与辐射诱导的肠上皮损伤和修复相关的一组差异或特异表达基因。
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| 关 键 词： | 动物实验 辐射损伤 基因克隆 差异显示 同源性 |
| 文章编号： | 1000-5404(2002)06-0705-04 |
| 修稿时间： | 2001-09-28 |
Screening for differentially expressed genes of intestinal epithelial cells derived from mice with mild intestinal type of radiation sickness with high homological primer DDRT-PCR |
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| HU Chuan min,SU Yong ping,CHENG Tian min,WANG Jun ping,LIU Xian hua,WANG Xiao dong,RAN Xin ze. Screening for differentially expressed genes of intestinal epithelial cells derived from mice with mild intestinal type of radiation sickness with high homological primer DDRT-PCR[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2002, 24(6): 705-708 |
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| Authors: | HU Chuan min SU Yong ping CHENG Tian min WANG Jun ping LIU Xian hua WANG Xiao dong RAN Xin ze |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | radiation injury gene clone DDRT PCR homology |
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