| 幽门螺杆菌外膜蛋白cagL基因的克隆、表达及其对IL-8 mRNA表达的影响 |
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| 引用本文： | 黄世腾,邵世和,韩军,黄河,田树伟. 幽门螺杆菌外膜蛋白cagL基因的克隆、表达及其对IL-8 mRNA表达的影响[J]. 江苏大学学报(医学版), 2010, 20(3): 194-198 |
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| 作者姓名： | 黄世腾 邵世和 韩军 黄河 田树伟 |
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| 作者单位： | 1. 江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室,江苏,镇江,212013
2. 江苏大学生命科学研究院,江苏,镇江,212013 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，江苏省高校自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H.pylori)NCTC11637菌株cagL基因,并探讨其对IL-8 mRNA表达的影响.方法:设计cagL引物,应用PCR扩增目的基因片段,TA克隆后测序分析, 用信息学软件分析其物理化学特性,并构建表达载体cagL-PET28a(+)转化E.coli BL-21(DE3),IPTG诱导表达, 镍亲和层析纯化,SDS- PAGE及蛋白质印迹鉴定表达蛋白.纯化蛋白与细胞GES-1共培养,提取细胞总RNA,RT-PCR检测细胞IL-8mRNA表达.结果:测序分析表明cagL编码成熟肽的碱基序列为654 bp,编码217个氨基酸,与基因库公布的其他H.pylori菌株的基因序列同源性为96%～98%,氨基酸同源性为 97%～99%,软件预测显示有多个明显的具有抗原活性的结构域;表达蛋白的相对分子质量约为32 000,蛋白质印迹检测融合蛋白具有良好的抗原活性;重组蛋白作用于GES-1细胞后,可诱导细胞因子 IL-8 在 mRNA 水平上的表达.结论:CagL蛋白可刺激GES-1细胞IL-8 mRNA的表达.
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 原核表达 白细胞介素-8 |
Gene cloning of cagL outer membrane protein from Helicobacter pylori and influence of interleukin-8 mRNA expressing |
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| HUANG Shi-teng,SHAO Shi-he,HAN Jun,HUANG He,TIAN Shu-wei. Gene cloning of cagL outer membrane protein from Helicobacter pylori and influence of interleukin-8 mRNA expressing[J]. Journal of Jiangsu University Medicine Edition, 2010, 20(3): 194-198 |
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| Authors: | HUANG Shi-teng SHAO Shi-he HAN Jun HUANG He TIAN Shu-wei |
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