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HL-60细胞向单核系和粒系分化的比较蛋白质组学研究
引用本文:王伟佳,唐薇,邱宗荫.HL-60细胞向单核系和粒系分化的比较蛋白质组学研究[J].癌症,2009,28(2):143-148.
作者姓名:王伟佳  唐薇  邱宗荫
作者单位:王伟佳,Wei-Jia Wang(重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016);唐薇,Wei Tang(重庆医科大学药物分析化学教研室,重庆,400016);邱宗荫,Zong-Yin Qiu(重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学药物分析化学教研室X,重庆,400016)  
基金项目:重庆市重大科技专项资金项目 
摘    要:背景与目的:已有研究发现NSC67657和全反式维甲酸可以诱导HL-60细胞分别向单核系和粒系分化。本研究比较分析不同诱导剂诱导HL-60细胞向单核系和粒系分化前后以及分化中的蛋白表达差异,发现与单核系和粒系分化有关的关键蛋白。方法:分别采用粒系分化诱导剂全反式维甲酸和单核系分化诱导剂NSC67657诱导HL-60细胞分化,MTT法检测细胞增殖情况:流式细胞技术分析细胞表面特异性分化抗原(CD11b/CD14)的表达,根据CD14表达情况计算细胞分化百分率;细胞化学染色对HL-60的两系分化进行验证。改良双向电泳分离技术对HL-60细胞全蛋白进行分离,PDQuest软件分析寻找差异蛋白点,基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)对蛋白点进行分析,RT-PCR和免疫印迹对差异蛋白ICAT进行验证。结果:全反式维甲酸和NSC67657均抑制HL-60细胞增殖,并分别诱导HL-60细胞向粒系和单核系分化。在2μmol/LATRA和10μmol/LNSC67657作用5d后.CD11b和CD14的表达均在90%以上,细胞化学染色支持细胞两系分化的结论。蛋白质组学分析表明,HL-60细胞分别向粒系和单核系分化后,有25个差异蛋白点的变化趋势在两系分化中是相同的,有10个差异蛋白点在单核系分化后表达有差异。有15个差异蛋白点在粒系分化后表达有差异:ICAT是其中差异蛋白之一,通过基因和蛋白水平验证.发现ICAT在NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化过程中表达升高,而在粒系和非处理细胞中表达无显著性差异。结论:双向电泳/MOLDI-TOFMS对HL-60细胞分化前后细胞全蛋白进行分析.发现了一批与两系分化有关的蛋白分子.为关键蛋白的筛选及其功能研究提供了重要的启示。

关 键 词:白血病  HL-60细胞  细胞分化  蛋白质组学

Comparative proteomics analysis on differentiation of human promyelocytic leukemia HL-60 cells into granulocyte and monocyte lineages
Wei-Jia Wang,Wei Tang,Zong-Yin Qiu.Comparative proteomics analysis on differentiation of human promyelocytic leukemia HL-60 cells into granulocyte and monocyte lineages[J].Chinese Journal of Cancer,2009,28(2):143-148.
Authors:Wei-Jia Wang  Wei Tang  Zong-Yin Qiu
Institution:Wei-Jia Wang, Wei Tang and Zong-Yin Qiu (1. Key Laboratory of Chongqing/ Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics of Ministry of Education, Chongqing Medical University, Chongqing, 400016, P. R. China 2. Department of Pharmaceutic Analytical Chemistry, Chongqing Medical University, Chongqing, 400016, P. R. China)
Abstract:
Keywords:leukemia  HL-60 cell  differentiation  proteomics
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