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弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体构建及在Vero细胞中的表达
引用本文:龙彩虹,吴少庭,翁亚彪,高世同,张仁利,林绮萍,谢德华,卜春玲,雷明军,黄达娜.弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体构建及在Vero细胞中的表达[J].中国病原生物学杂志,2004,17(6):331-334.
作者姓名:龙彩虹  吴少庭  翁亚彪  高世同  张仁利  林绮萍  谢德华  卜春玲  雷明军  黄达娜
作者单位:1. 华南农业大学兽医学院
2. 深圳市卫生防疫站分子生物室,广东深圳,518020
3. 华中科技大学同济医学院
摘    要:目的 构建弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体 ,并在Vero细胞中表达。 方法 设计 1对引物 ,从弓形虫RH株速殖子基因组DNA中扩增SAG2全长编码基因 ,构建 pVAX1 SAG2真核表达重组质粒。以限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ进行双酶切、PCR鉴定 ,纯化后进行测序鉴定。脂质体介导法瞬时转染Vero细胞 ,同时以 pVAX1为对照 ,48h后收集细胞 ,Western blot鉴定。 结果 从弓形虫RH株DNA中扩增出了 5 77bp的SAG2基因 ,构建了真核表达载体 pVAX1 SAG2 ,在质脂体介导下转染Vero细胞 ,质粒DNA成功的转染到细胞中。通过Westen blot分析 ,细胞裂解液样品有 1条可被弓形虫免疫血清所识别的约 17ku大小的条带 ,与预计大小一致。 结论 真核表达载体pVAX1 SAG2在Vero细胞中有一定表达 ,且有一定的活性。

关 键 词:弓形虫  SAG2  基因克隆  表达
文章编号:1001-6627(2004)06-0331-04
修稿时间:2004年2月23日

CLONING AND EUKARYOTIC EXPRESSION OF SAG2 GENE OF TOXOPLASMA GONDII
LONG Cai hong,WU Shao ting,WENG Ya biao.CLONING AND EUKARYOTIC EXPRESSION OF SAG2 GENE OF TOXOPLASMA GONDII[J].Journal of Pathogen Biology,2004,17(6):331-334.
Authors:LONG Cai hong  WU Shao ting  WENG Ya biao
Abstract:
Keywords:Toxoplasma gondii  SAG2  cloning  expression
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