| 反向杂交法检测乙型肝炎病毒3种核苷(酸)类似物耐药突变 |
| |
| 引用本文： | 刘彦辰,张文露,胡源,赵丽,赖国旗,胡接力,杨凤,黄爱龙. 反向杂交法检测乙型肝炎病毒3种核苷(酸)类似物耐药突变[J]. 中华肝脏病杂志, 2010, 18(1): 414-418. DOI: 10.3760/j.issn.1007-3418.2010.06.005 |
| |
| 作者姓名： | 刘彦辰 张文露 胡源 赵丽 赖国旗 胡接力 杨凤 黄爱龙 |
| |
| 作者单位： | 重庆医科大学病毒性肝炎研究所、教育部感染性疾病分子生物学重点实验室,400016; |
| |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
| |
| 摘 要： | 目的 建立一种同时检测HBV 3种核苷(酸)类似物耐药突变的方法.方法 以基因库公布的981条HBV基因序列为基础,设计2对地高辛标记的通用引物,扩增HBV聚合酶的逆转录区.针对拉米夫定、阿德福韦和恩替卡韦10个耐药位点上的氨基酸替换形式,设计26条特异性寡核苷酸探针,包括I169T,V173L/G,L180M,A181T/V,T184G,S202I/G,M204V/I,Q215S,N236T,M250V/I/L,并固定于带正电荷的尼龙膜上.利用地高辛标记的靶DNA扩增产物与固定于膜上的特异性探针的反向杂交,检测HBV 3种核苷(酸)类似物的耐药突变.应用反向杂交法分别检测HBV野生和耐药标准株,以及40例患者血清标本,观察其检测特异性和准确性.结果 反向杂交法检测HBV野生和耐药标准株,有效地区分了1169T,V173L,L180M,A1811T,T184G,S202I,M204V,Q215S,N236T,M250V 10个耐药位点上的特异性探针.40例患者血清标本中,37例临床病例的耐药检测结果 与直接测序法一致.结论 反向杂交法可以快速,准确的检测出HBV3种核苷类似物耐药突变,有助于这3种药物耐药的诊断和个体化治疗.
|
| 关 键 词： | 肝炎病毒,乙型 抗药性,自然 核苷(酸)类 反向杂交 |
Detection of HBV resistant mutations related to lamivudine, adefovir and entecavir by reverse hybridization technique |
| |
| LIU Yan-chen,ZHANG Wen-lu,HU Yuan,ZHAO Li,LAI Guo-qi,HU Jie-li,YANG Feng,HUANG Ai-long. Detection of HBV resistant mutations related to lamivudine, adefovir and entecavir by reverse hybridization technique[J]. Chinese journal of hepatology, 2010, 18(1): 414-418. DOI: 10.3760/j.issn.1007-3418.2010.06.005 |
| |
| Authors: | LIU Yan-chen ZHANG Wen-lu HU Yuan ZHAO Li LAI Guo-qi HU Jie-li YANG Feng HUANG Ai-long |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Hepatitis B virusResistance naturalNucleos(t)idesReverse hybridization |
|
|
