人睾丸cDNA文库的构造 |
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作者姓名: | 沙家豪 周作民 胡志刚 周亚东 张适 冯笑川 蔡银龙 吴观陵 |
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作者单位: | 南京医学院组织胚胎学教研室,南京医学院组织胚胎学教研室,南京医学院组织胚胎学教研室,南京医学院组织胚胎学教研室,南京医学院组织胚胎学教研室,南京医学院分子生物学基地,南京医学院分子生物学基地,南京医学院分子生物学基地 |
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摘 要: | 本研究运用异硫氰酸胍-酚-乙醇法提取人睾丸组织中的RNA,并用高效Oligo(dt)cellulose从中纯化mRNA,以此为模板,在AMV反转录酶作用下,制备互补的DNA(ss-cDNA),RNaseH降解模板mRNA,经DNA多聚酶I作用以ss-cDNA为模板合成第二链(ds-cDNA)。用T_4DNA多聚酶制备cDNA的平末端,在T_4DNA连接酶的
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