| 黑色素瘤抗原MAGE-A9基因在真核细胞中的表达研究 |
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| 引用本文： | 于智勇,薛庆於,沈维干.黑色素瘤抗原MAGE-A9基因在真核细胞中的表达研究[J].细胞与分子免疫学杂志,2008,24(6):626-628. |
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| 作者姓名： | 于智勇 薛庆於 沈维干 |
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| 作者单位： | 1. 扬州教育学院生物系,江苏,扬州,225009
2. 扬州大学医学院,江苏,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 扬州大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆MAGE-A9基因并对其进行真核表达及鉴定.方法:通过逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)从原发性肝癌的细胞中扩增MACE-A9基因片段,将该片段克隆在真核表达载体pEGFP-C3中,转染NIH3T3细胞,经G418筛选,构建稳定表达细胞系,并用荧光显微镜和Western blot对其进行鉴定.结果:经RT-PCR扩增出945 bp基因片段,经测序分析并与GenBank的DNA序列比对分析后,在NIH3T3细胞中表达.G418筛选后,细胞荧光信号较强,Western blot检测,细胞中的融合蛋白能够与抗MACE-A9的多抗结合.结论:成功地扩增了肝细胞肝癌中的MAGE-A9基因全长cDNA并进行真核表达与鉴定.
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| 关 键 词： | MACE-A9 真核表达 稳定细胞系 黑色素瘤抗原 基因片段 真核细胞 表达与鉴定 肝细胞肝癌 结合 多抗 融合蛋白 检测 荧光信号 比对分析 序列 GenBank 测序分析 结果 Western blot 荧光显微镜 稳定表达细胞系 筛选 |
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