| 兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法 |
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| 引用本文： | 秦海斌,刘怀然,刘家森,姜骞,韩凌霞,司昌德,曲连东. 兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法[J]. 中国比较医学杂志, 2007, 17(8): I0020-I0024 |
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| 作者姓名： | 秦海斌 刘怀然 刘家森 姜骞 韩凌霞 司昌德 曲连东 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部实验动物质量监督检验测试中心,哈尔滨,150001;西北农林科技大学动物科技学院,陕西,杨凌,712100
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部实验动物质量监督检验测试中心,哈尔滨,150001 |
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| 摘 要： | 为了有效地预防和根除山羊痘，研制能够区分自然感染和疫苗免疫的标记疫苗。本研究在山羊痘病毒（goat pox virus，GPV）疫苗株AV41胸苷激酶（thymidine kinase，TK）基因克隆、鉴定的基础上，构建转移载体。将痘苗病毒（Vaccinia Virus，VV）晚期启动子P11和大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因（LacZ）报告基因片段插入含有TK片段同源臂的载体pTK的KpnI酶切位点，经酶切、PCR鉴定出，命名为pTK-LacZ。用脂质体法转染感染了GPVAV41株的犊牛睾丸（bovine testes，BT）细胞，待出现80%以上的细胞病变时收获病毒，经过连续9代蓝色蚀斑筛选、纯化和PCR鉴定，获得纯化的表达LacZ基因、TK功能缺失的重组病毒，命名为rGPV-LacZ。生物学特性研究显示，LacZ基因的插入不影响重组病毒的增殖特性，其毒力、生长特性与亲本株相似，保持原有疫苗株的生长特性，而且在BT细胞和羔羊睾丸（lamb testes，LT）细胞连续传20代遗传性状很稳定。本研究筛选、纯化的重组病毒rGPV-LacZ可以区分自然感染和疫苗免疫动物，为进一步研制山羊痘病毒基因工程标记疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 抗原捕获 单克隆抗体 兔瘟 |
| 文章编号： | 1671-7856（2007）08-S20-05 |
| 修稿时间： | 2007-06-12 |
Development of an Antigen Capture ELISA for Detecting Rabbit Hemorrhagic Disease Virus |
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| QIN Hai-bin,LIU Huai-ran,LIU Jia-sen,JIANG Qian,HAN Ling-xi,SI Chang-de,QU Lian-dong. Development of an Antigen Capture ELISA for Detecting Rabbit Hemorrhagic Disease Virus[J]. Chinese Journal of Comparative Medicine, 2007, 17(8): I0020-I0024 |
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| Authors: | QIN Hai-bin LIU Huai-ran LIU Jia-sen JIANG Qian HAN Ling-xi SI Chang-de QU Lian-dong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ELISA |
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