癌胚抗原化学发光免疫分析方法学研究

目的研制化学发光免疫分析法(CLIA)癌胚抗原(CEA)检测试剂盒。方法采用双抗体夹心法用2种不同的单克隆抗体分别与CEA分子上不同的抗原决定簇发生反应。用1株单抗包被微孔板制成固相抗体,用另1株单抗标记碱性磷酸酶(ALP)制成酶标抗体。在包被微孔中加入CEA校准品或待测血清及酶标抗体,温育后即形成固相抗体-抗原-酶标抗体的复合物,充分洗涤后加入化学发光底物液,于30～90 min内测定其发光强度(RLU),根据标准曲线即可算出标本中CEA的含量。结果该试剂盒其敏感性可达0.058 ng/mL;批内和批间变异系数(CV)分别为5.5%～9.3%和10.2%～12.2%。经实验表明,CLIA与免疫放射分析法(IRMA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别呈高度相关,相关系数(r)分别为0.991、0.984;平均回收率为97.3%。结论新研制的CEA CLIA试剂盒各项技术指标均达到了国外同类产品水平。