| 应用实时荧光定量PCR检测血清miR-122和miR-22及其在慢性乙型肝炎患者中的表达 |
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| 引用本文： | 姜跃炜,叶瑾,朱小区.应用实时荧光定量PCR检测血清miR-122和miR-22及其在慢性乙型肝炎患者中的表达[J].医学研究杂志,2015,44(10):121-124. |
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| 作者姓名： | 姜跃炜 叶瑾 朱小区 |
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| 作者单位： | 325000 温州市中医院检验科;325000 温州市中医院检验科;325000 温州市中医院检验科 |
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| 摘 要： | 目的 建立血清中microRNA(miRNA)的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的检测方法,对慢性乙型肝炎患者血清中miR-122和miR-22的表达水平进行检测和分析,探讨其在慢性乙型肝炎患者血清中表达的意义。 方法 茎环引物用于成熟型miRNA反转录,以建立SYBR Green Ⅰ PCR筛选和定量检测miRNA的方法。同时,采用10倍梯度稀释的miR-122标准品cDNA(1~109拷贝/微升)评价其敏感度;采用熔解曲线评价其检测miRNA的特异性;通过对2×105、2×106、2×107拷贝/微升的miR-122标准品cDNA分别进行批内20次重复实验,以其循环阈值(Ct)的变异系数(CV)评价其精密度。采用建立的qRT-PCR技术检测慢性乙型肝炎患者及正常人血清中miR-122和miR-22的表达水平。 结果 建立了茎环引物的RT-PCR法检测血清中的miRNA,该方法的线性范围宽,敏感度高,重复性好,方法简便。在慢性乙型肝炎患者组中血清miR-122和miR-22的相对表达量分别为17.88和5.35;与正常对照组中血清miR-122和miR-22的相对表达量(分别为1.80和1.67)比较,差异有统计学意义(P均=0.000)。 结论 建立了茎环引物RT-PCR实时荧光定量PCR方法检测血清中的miR-122和miR-22,血清miR-122和miR-22在慢性乙型肝炎患者的血清中表达显著升高。
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| 关 键 词： | miR-122 miR-22 慢性乙型肝炎 |
| 收稿时间： | 2015/1/29 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2015/2/10 0:00:00 |
Detection of Serum miR-122 and miR-22 in Patients with Chronic Hepatitis B by Using of a Quantitative Real-time PCR |
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| Jiang Yuewei,Ye Jin and Zhu Xiaoqu.Detection of Serum miR-122 and miR-22 in Patients with Chronic Hepatitis B by Using of a Quantitative Real-time PCR[J].Journal of Medical Research,2015,44(10):121-124. |
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| Authors: | Jiang Yuewei Ye Jin and Zhu Xiaoqu |
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| Institution: | The Traditional Chinese Medical Hospital of Wenzhou, Zhejiang 325000, China;The Traditional Chinese Medical Hospital of Wenzhou, Zhejiang 325000, China;The Traditional Chinese Medical Hospital of Wenzhou, Zhejiang 325000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | miR-122 miR-22 Chronic hepatitis B |
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