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| 非病毒性基因治疗递送载体(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k的构建及性能研究 | |
| 引用本文： | 黄伟,吕明,高钟镐,金明姬,杨飞飞,王玉丽.非病毒性基因治疗递送载体(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k的构建及性能研究[J].解放军医学杂志,2011,36(5):437-441. |
| 作者姓名： | 黄伟 吕明 高钟镐 金明姬 杨飞飞 王玉丽 |
| 作者单位： | 1. 中国医学科学院,北京协和医学院药物研究所,北京,100050 2. 延边大学药学院,延吉,133000 3. 军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850 |
| 摘 要： | 目的构建非病毒性基因治疗递送载体(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k,探讨其细胞毒性及对质粒基因(pDNA)的递送性能。方法通过开环聚合反应制备共聚物mPEG5k-PCL1.2k-OH,将其羟基末端化学转化为N-羟基琥珀酰亚胺(-NHS)生成mPEG5k-PCL1.2k-NHS,随后同枝化PEI10k进行反应生成三元共聚物(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k。应用傅立叶变换红外光谱(FTIR)、核磁共振(NMR)和凝胶渗透色谱对(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k进行结构表征分析;通过MTT分析,比较(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k与PEI10k的细胞毒性;通过复凝聚法制备(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k/pDNA复合物;通过细胞转染实验,观察不同质量比的复合物转染细胞后报告基因的表达效果,考察转染时间和培养基pH值对报告基因表达的影响。结果成功合成了递送载体(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k。浓度小于62.5g/ml时,(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k的细胞毒性显著小于PEI10k。(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k载体能够压缩绿色荧光蛋白质粒报告基因(pEGFP)形成(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k/pEGFP复合物,并有效转染细胞获得目的基因表达;当载体与质粒的质量比为10∶1时,绿色荧光蛋白的表达效果最好。转染时间和培养基pH值均可影响(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k/pEGFP的转染效率,转染效率在48h优于24h和72h,pH6.8培养基优于pH7.2培养基。结论递送载体(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k细胞毒性较低,能够递送pDNA进入细胞并表达目的蛋白。 |
| 关 键 词： | 非病毒载体 基因治疗 质粒 转染 |
Construction of non-viral vector (mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k and its gene delivery efficacy in vitro |
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| HUANG Wei,LV Ming,GAO Zhong-gao,JIN Ming-ji,YANG Fei-fei,WANG Yu-li.Construction of non-viral vector (mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k and its gene delivery efficacy in vitro[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2011,36(5):437-441. | |
| Authors: | HUANG Wei LV Ming GAO Zhong-gao JIN Ming-ji YANG Fei-fei WANG Yu-li |
| Institution: | .Institute of Materia Medica,Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College,Beijing 100050,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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