人支气管上皮细胞中苯并芘诱导TNF-α表达的分子机制

目的：构建肿瘤坏死因子-α（TNF-α）启动子双荧光素酶报告基因载体,研究苯并芘（Ba]P）暴露对TNF-αm RNA表达的调控机制。方法：采用Real time-PCR技术检测Ba]P暴露下,人支气管上皮细胞（Beas-2B）中TNF-αm RNA随时间的变化趋势。通过分子克隆技术构建TNF-α启动子双荧光素酶报告基因载体并检测其活性。进一步检测Beas-2B细胞和人肾上皮细胞293T细胞暴露于Ba]P环境下,TNF-α启动子活性的变化趋势。结果：Real time-PCR检测Ba]P暴露下,24 h内,Beas-2B细胞中TNF-αm RNA表达量随时间延长升高。且Ba]P刺激Beas-2B细胞24 h内,TNF-α启动子活性也呈升高趋势。Ba]P刺激293T细胞,TNF-α启动子活性也会升高。结论：成功构建了TNF-α启动子双荧光素酶报告基因载体。而且,Ba]P能够促进TNF-αm RNA的转录从而促进TNF-αm RNA的表达,且promoter1要比promoter2活性强,没有细胞特异性。