| IFN-α2a - GFE-1融合基因的构建及表达 |
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| 引用本文： | 张小军,杨玉岭,张英起.IFN-α2a - GFE-1融合基因的构建及表达[J].武警医学,2003,14(8):460-463. |
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| 作者姓名： | 张小军 杨玉岭 张英起 |
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| 作者单位： | 武警河北总队医院外一科,石家庄,050081;第四军医大学生物技术中心,西安,710032 |
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| 摘 要： | 目的构建IFN-α 2a-GFE-1融合基因载体,检测其在转染细胞的表达,为肺癌基因导向药物治疗积累实验资料.方法应用聚合酶链式反应技术(PCR)对干扰素(IFN)-α 2a羧基端的酶切位点进行改造,并人工合成肺特异性结合多肽CGFECVRQCPERC(GFE-1)的寡核苷酸片段,二者连接后克隆入pGEM-3zf质粒,连接产物转化感受态DH5α细胞,挑选阳性克隆经EcoRⅠ+PstⅠ酶切鉴定后测序,将测序正确的目的基因从测序载体相应酶切位点消化回收并纯化后,与上述酶处理过的PBV220质粒连接,连接产物常规转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,经筛选后随机挑选阳性菌落,提取质粒酶切鉴定.结果序列分析表明合成片段成功的插入IFN-α 2a羧基端,大小、位置、方向均正确无误;融合基因克隆入PBV 220表达载体在大肠杆菌中获得有效表达.结论IFN-α 2a-GFE-1融合基因载体的构建及表达,为检测其在肺内特异性分布及抑瘤活性研究提供了实验基础.
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| 关 键 词： | 干扰素-α2a 肺特异性结合多肽 融合基因 |
| 收稿时间： | 2003-03-21 |
| 修稿时间： | 2003年3月21日 |
Construction and expression of IFN-2a-GFE-1 fusion gene |
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| ZHANG Xiaojun,YANG Yuling,and ZHANG Yingqi.First.Construction and expression of IFN-2a-GFE-1 fusion gene[J].Medical Journal of the Chinese People's Armed Police Forces,2003,14(8):460-463. |
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| Authors: | ZHANG Xiaojun YANG Yuling and ZHANG YingqiFirst |
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| Institution: | ZHANG Xiaojun,YANG Yuling,and ZHANG Yingqi.First Department of Surgery,Hebei Provincial Corps Hospital,Chinese People's Armed Police Forces,Shijiazhuang 050081,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | IFN-2a Lung specific-binding peptide Fusion gene |
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