用消减杂交技术克隆人成骨样细胞机械牵张力敏感基因的研究

目的 :对人成骨样细胞机械牵张力敏感基因进行克隆研究。方法 :对人成骨样细胞Saos 2进行二维方向上的加载 ,变形幅度为 12 % ,牵拉频率为 6周 /分钟 ,加载 12小时后分别提取牵张力作用后Saos 2细胞及未作处理的正常Saos 2对照细胞的mR NA ,反转录制备cDNA ,将cDNA进行消减杂交 ,构建加载细胞与未加载细胞的差异表达基因的扣除cDNA文库 ,克隆后进行序列测定。结果 :克隆到的基因片段中 ,功能已知基因片段 15个 ,功能未知基因片段 2个 ,其中牵张力敏感基因 (SSG1)位于 9号染色体上 ,功能未知 ;牵张力敏感基因 (SSG2 )位于 18号染色体上 ,与转录因子 2 ,4高度同源。结论 :用消减杂交技术可以对人成骨细胞样机械牵张力敏感基因进行有效的克隆研究。