| 肝素酶反义RNA真核表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 丁力,唐琳,赵国强,戚敏,吴红霞,周炳英.肝素酶反义RNA真核表达载体的构建及鉴定[J].河南职工医学院学报,2005,17(5):259-262. |
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| 作者姓名： | 丁力 唐琳 赵国强 戚敏 吴红霞 周炳英 |
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| 作者单位： | [1]郑州大学基础医学院,河南郑州450052 [2]信阳市计划生育研究所,河南信阳464000 |
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| 基金项目： | 国家“十五”“211工程”重点学科建设项目教重办（2002）第2号河南省医学科技创新人才工程项目（2003112007） |
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| 摘 要： | 目的 构建肝素酶（heparanase，Hpa）反义RNA真核表达载体。方法 提取胃癌组织总RNA，按照GenBank中检索出的Hpa基因cDNA序列，设计并合成反义Hpa基因片段的引物，进行RT-PCR，并将扩增产物克隆至DGEMT载体，PCR鉴定及测序证实后，双酶切pGEM-T-antiHpa重组体回收目的片段，再将其反向亚克隆到真核表达质粒pcDNA3．1中，并对阳性克隆进行酶切鉴定和测序分析。结果 PCR扩增出的反义片段与预期长度相符。构建的Hpa反义RNA表达质粒pcDNA3．1-antiHpa，分别作PCR及双酶切（BamHⅠ和HindⅢ）鉴定，证实其中有目的片段完整插入，插入片段测序结果与反义Hpa序列设计完全一致。结论 成功构建了Hpa反义RNA真核表达载体pcDNA3．1-antiHpa，此结果为进一步研究Hpa蛋白分子的生物学功能和以Hpa为靶点的恶性肿瘤的基因治疗研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 肝素酶 表达载体 反义 基因克隆 |
| 文章编号： | 1008-9276(2005)05-0259-04 |
| 收稿时间： | 03 2 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 2005年3月2日 |
Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector for Antisense Heparanase |
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| DING Li, TANG Lin, ZHAO Guo-qiang QI Min, WU Hong-xia, ZHUO Bing-ying.Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector for Antisense Heparanase[J].Journal of Henan Medical College For Staff and Workers,2005,17(5):259-262. |
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| Authors: | DING Li TANG Lin ZHAO Guo-qiang QI Min WU Hong-xia ZHUO Bing-ying |
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| Institution: | 1. Basic Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052; 2. Institute of Family Plan, Xinyang , 464000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | heparanase expression vector antisense gene clone |
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