基于TNF/NF-κB信号通路探讨枳实薤白桂枝汤减轻心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制

目的 从肿瘤坏死因子/核转录因子-κB（TNF/NF-κB）信号通路探讨枳实薤白桂枝汤（ZXGT）对异丙肾上腺素（ISO）诱导的大鼠心肌梗死（MI）的影响。方法 将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、培哚普利组（4 mg·kg^-1）、ZXGT组（24.4 g·kg^-1）、ZXGT+抑制剂组（ZXGT，24.4 g·kg^-1；TNF-α受体抑制剂R7050，5 mg·kg^-1）、抑制剂组（R7050，5 mg·kg^-1），每组8只；各组大鼠预防性灌胃给药7 d，且ZXGT+抑制剂组、抑制剂组在第6、第7天给予腹腔注射抑制剂R7050 5 mg·kg^-1，除空白组外其余各组腹腔注射ISO，连续2 d，诱导大鼠MI模型；于实验第7天注射ISO 30 min后麻醉大鼠，检测心电图（ECG）观察ST段抬高值；采用小动物超声心动图检测大鼠心脏整体轴向应变（GLS）和心脏同步性；腹主动脉取血测定血清心肌肌钙蛋白T（cTnT）、肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）水平及炎症因子TNF-α、白细胞介素-1β（IL-1β）水平；苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织病理变化；免疫组化（IHC）法检测心脏组织TNF-α、NF-κB p65、磷酸化（p）-NF-κB p65蛋白表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心脏组织肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）、肿瘤坏死因子受体相关因子2（TRAF2）、转化生长因子激酶1（TAK1）、NF-κB抑制蛋白α（IκBα）、p-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠ECG ST段显著抬高（P<0.01），超声心动图中GLS增大及同步性显著降低（P<0.01），病理组织学显示心肌大面积坏死，血清cTnT、CK-MB、LDH、TNF-α、IL-1β水平显著升高（P<0.01），心肌组织中的TNF-α、TNFR1、TRAF2、TAK1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平显著升高（P<0.01），IκBα蛋白表达水平显著降低（P<0.01）；与模型组比较，培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组大鼠的ECG ST段抬高值明显降低（P<0.05，P<0.01），GLS和心脏同步性改善（P<0.05，P<0.01），心肌坏死面积减小，血清cTnT、CK-MB、LDH、TNF-α、IL-1β水平均下调（P<0.01），且ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组均下调模型大鼠升高的TNF-α、TNFR1、TRAF2、TAK1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平和上调IκBα的表达水平（P<0.05，P<0.01）；与ZXGT组比较，ZXGT+抑制剂组和抑制剂组差异无统计学意义。结论 ZXGT能保护ISO诱导的大鼠MI损伤，改善心脏功能，其作用机制可能与调控TNF/NF-κB信号通路有关。