葛菊护肝片调节NF-κB和Bcl-2/Bax信号通路改善酒精所致的小鼠肝脏损伤

目的 探究葛菊护肝片对酒精性肝损伤小鼠肝脏的保护作用，并基于核转录因子-κB p65（NF-κB p65）和B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）蛋白/Bcl-2相关X蛋白（Bax）信号通路探讨其作用机制。方法 SPF级雄性ICR小鼠60只，按体质量随机分为正常组、模型组、复方益肝灵片组、葛菊护肝片低、中、高剂量组。葛菊护肝片低、中、高剂量组分别灌胃0.2、0.4、0.8 g·kg^-1葛菊护肝片；复方益肝灵片组灌胃剂量0.16 g·kg^-1的复方益肝灵片，连续28 d，每天给药1次；正常组及模型组灌胃等体积纯水。第29天除正常组外，其余各组小鼠灌胃53°白酒，灌胃2次，灌胃间隔6 h；第30天取材。苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织病理改变；透射电镜观察肝细胞超微结构改变；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肝组织丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）、甘油三酯（TG）、血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织NF-κB p65、磷酸化核因子抑制蛋白α（p-IκBα）、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组血清ALT、AST含量显著升高（P<0.01），肝组织MDA、TG含量显著升高（P<0.01），GSH含量显著下降（P<0.01），肝脏HE染色、油红O和电镜肝损伤评分显著升高（P<0.01）；肝组织NF-κB、p-IκBα、Bax蛋白表达量均明显升高（P<0.05，P<0.01），Bcl-2蛋白表达量明显降低（P<0.05）。与模型组比较，葛菊护肝片低、中、高剂量组血清ALT、AST含量显著下降，肝组织MDA、TG含量显著下降，GSH含量显著增加（P<0.01）；葛菊护肝片中、高剂量组HE和电镜评分显著降低（P<0.01）；葛菊护肝片中、高剂量组小鼠肝组织NF-κB、p-IκBα、Bax蛋白表达量显著降低（P<0.01），葛菊护肝片低、中、高剂量组Bcl-2蛋白表达量显著升高（P<0.01）。结论 葛菊护肝片对ALD小鼠肝脏有一定的保护作用，其机制可能是通过下调NF-κB信号通路减轻肝组织炎症，下调Bax蛋白表达，上调Bcl-2蛋白表达抑制肝细胞凋亡实现的。