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人牙囊细胞的体外分离、培养及表型鉴定
引用本文:常秀梅,刘宏伟,金岩,刘源,贺慧霞. 人牙囊细胞的体外分离、培养及表型鉴定[J]. 临床口腔医学杂志, 2004, 20(12): 717-720
作者姓名:常秀梅  刘宏伟  金岩  刘源  贺慧霞
作者单位:南方医科大学附属南方医院口腔科,广东,广州,510515;第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心;第四军医大学口腔医院牙体科
基金项目:国家 8 63计划重大专项 :组织器官工程基金资助项目 (2 0 0 2AA2 0 50 4 1 )
摘    要:目的 :建立人牙囊细胞 (dentalfolliclecells ,DFCs)的体外培养方法 ,为牙周组织工程研究提供可靠的种子细胞来源。方法 :分离人 8月龄胚胎下颌磨牙牙胚 ,胰酶消化后分离牙囊组织 ,采用胶原酶消化法和组织块法相结合原代培养人牙囊细胞 ,利用牙囊细胞和上皮根鞘细胞对胰酶的耐受性差别分离纯化 ,通过倒置显微镜及HE染色观察细胞形态及生长状况、透射电镜观察细胞的超微结构 ;采用免疫组化波形丝蛋白 (vimemtin ,Vim)、角蛋白(cytokeration ,CK)、Ⅰ型胶原 (typeⅠcollagen ,ColⅠ )、Ⅲ型胶原 (typeⅢcollagen ,ColⅢ )、纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)和早期矿化相关的标志骨桥蛋白 (osteopontin ,OPN)、骨涎蛋白 (bonesialapretion ,BSP)的表达情况对细胞做表型鉴定。结果 :原代培养的人牙囊细胞生长良好 ,但其中混有少量上皮根鞘细胞 ,经传代可完全分离 ,传至 11代仍保持原有活力 ;牙囊细胞为长梭型 ,成纤维样 ;电镜下见细胞核浆比例大 ,核仁明显 ,含有溶酶体、大量的粗面内质网和发达的高尔基体 ,含有大量的中间丝。电镜结果显示细胞代谢旺盛 ,增殖活性高 ,含有牙囊细胞特有的高密度电子颗粒 ,免疫组化Vim、ColⅠ、ColⅢ、FN、OPN、BSP呈阳性着色 ,抗角蛋白呈阴性着色。结论 :本实验培养的是牙囊细

关 键 词:人牙囊细胞  细胞培养  鉴定
文章编号:1003-1634(2004)12-0717-04

Culture and characterization of the dental follicle cells from human dental germ in vitro
CHANG Xiu-mei,LIU Hong-wei,JIN Yan,LIU Yuan,HE Hui-xia. Culture and characterization of the dental follicle cells from human dental germ in vitro[J]. Journal of Clinical Stomatology, 2004, 20(12): 717-720
Authors:CHANG Xiu-mei  LIU Hong-wei  JIN Yan  LIU Yuan  HE Hui-xia
Affiliation:CHANG Xiu-mei,LIU Hong-wei,JIN Yan,LIU Yuan,HE Hui-xia.Department of Operative Dentistry and Periodontal,The First Military Medical University,Guangzhou 510515,China
Abstract:
Keywords:human dental follicle cells  cell culture  characterization
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