| 人线粒体DNA荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王学波,李建远. 人线粒体DNA荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 生物医学工程研究, 2008, 27(4) |
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| 作者姓名： | 王学波 李建远 |
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| 作者单位： | 青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院中心实验室,山东烟台,264000;青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院中心实验室,山东烟台,264000 |
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| 摘 要： | 建立SYBR Green I实时荧光PCR定量检测人线粒体DNA的方法。选取人线粒体DNA高度保守基因片段,将该基因片段与pCF-T载体连接后,转化入E.coli DH5α,提取重组质粒PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR-Green I荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线。结果表明:构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含101~108拷贝时,扩增反应CT值与拷贝数的对数成线性关系),相关系数为0.997。批内和批间重复性测定的变异系数分别为1.23%~3.29%以及3.10%~5.21%。我们成功建立了实时荧光定量PCR检测人线粒体DNA的方法,该方法可作为进一步研究线粒体DNA的方法,在相关疾病诊断和监测中具有一定的应用前景。
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| 关 键 词： | SYBR Green I 荧光定量PCR 线粒体DNA 聚合酶链反应 人 |
Establishment of the Method for Detecting Human Mitochondrial DNA with Fluorescence Quantitative Ploymerase Chain |
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| WANG Xuebo,LI Jianyuan. Establishment of the Method for Detecting Human Mitochondrial DNA with Fluorescence Quantitative Ploymerase Chain[J]. Journal Of Blomedical Englneerlng Research, 2008, 27(4) |
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| Authors: | WANG Xuebo LI Jianyuan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SYBR Green I Fluorescent qunantitative PCR Mitochondrial DNA Polymerase chain reaction Human |
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