| 脂质体法介导pIRES2-EGFP-hVEGF165转染人胎盘源间充质干细胞 |
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| 引用本文： | 王博蔚,高尚,朱振威,刘春丽,朱镇,刘志辉. 脂质体法介导pIRES2-EGFP-hVEGF165转染人胎盘源间充质干细胞[J]. 吉林大学学报(医学版), 2012, 38(2): 270-275 |
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| 作者姓名： | 王博蔚 高尚 朱振威 刘春丽 朱镇 刘志辉 |
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| 作者单位： | 吉林大学第二医院妇产科,吉林长春,130041;吉林大学口腔医院口腔修复科,吉林长春,130021;吉林大学口腔医院口腔颌面外科,吉林长春,130021;江苏省镇江市口腔医院口腔修复科,江苏镇江,212002 |
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| 基金项目： | 吉林省科技厅青年科技基金资助课题，吉林大学基本科研业务经费资助课题，江苏省镇江市社会发展科技支撑项目资助课题 |
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| 摘 要： | 目的：构建人血管内皮生长因子165（hVEGF165）的真核表达质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165，通过脂质体法将其转入人胎盘源间充质干细胞(HPMSCs)中，鉴定hVEGF165的表达活性及携带目的基因的HPMSCs的多向分化潜能。方法：采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 技术，从人白血病细胞HL-60中扩增出hVEGF165的基因片段，构建pIRES2-EGFP-hVEGF165 重组质粒，经酶切检测其构建的正确性，通过脂质体法转染HPMSCs后分别采用RT-PCR、Western blotting 法及MTT法检测其转录和表达活性；荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)，检测含有报告基因EGFP空载体及携带报告基因和目的基因的真核表达载体转染靶细胞的情况；并再次鉴定转染后HPMSCs的多向分化潜能。结果：成功构建重组质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165；RT-PCR、Western blotting及MTT法检测表明，构建的质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165具有转录及表达活性；绿色荧光显微镜下观察到EGFP表达，目的基因成功转入靶细胞，携带目的基因的HPMSCs仍保持多向分化潜能。结论：成功构建具有表达活性的hVEGF165真核表达质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165，hVEGF165在HPMSCs中具有转录及表达活性，且对HPMSCs的增殖具有促进作用；HPMSCs本身可能具有hVEGF165的内分泌功能。
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| 关 键 词： | 人血管内皮生长因子165 人胎盘源间充质干细胞 脂质体 转染 |
| 收稿时间： | 2011-12-21 |
Transfection of human placenta-derived mesenchymal stem cells with liposome-mediated pIRES2-EGFP-hVEGF165 |
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| WANG Bo-wei , GAO Shang , ZHU Zhen-wei , LIU Chun-li , ZHU Zhen , LIU Zhi-hui. Transfection of human placenta-derived mesenchymal stem cells with liposome-mediated pIRES2-EGFP-hVEGF165[J]. Journal of Jilin University: Med Ed, 2012, 38(2): 270-275 |
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| Authors: | WANG Bo-wei GAO Shang ZHU Zhen-wei LIU Chun-li ZHU Zhen LIU Zhi-hui |
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| Affiliation: | 1. Department of Obstetrics and Gynecology, Second Hospital,Jilin University,Changchun 130041, China;2. Department of |Prosthodontics,Stomatology Hospital,Jilin University,Changchun 130021, China;3. Department of |Oral and Maxillofacial Surgery, Stomatology Hospital,Jilin University,Changchun 130021,China;4. Department of |Prosthodontics,Stomatology Hospital of Zhenjiang, Zhenjiang 212002,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human vascular endothelial growth factor 165 human placental mesenchymal stem cells liposome transfection |
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