| 摘 要： | 目的 研究siRNA单独或多重沉默原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中血管内皮细胞生长因子A(VEGFA)及血管内皮细胞生长因子受体1/2/3(VEGFR1/2/3)表达对其血管生成的影响。方法 HUVECs分为空白对照组,阴性对照组与实验组。空白对照组不给予转染,阴性对照组转染100 nmol·L-1siNC,实验组分为4组并分别转染100 nmol·L-1siVEGFA及siVEGFR1/2/3。以反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测siRNAs的沉默效率。HUVECs分为空白对照组,阴性对照组,沉默单靶点组和多靶点组,空白对照组不给予转染,阴性对照组转染100 nmol·L-1siNC,沉默单靶点组分为4组并分别转染100 nmol·L-1siVEGFA及siVEGFR1/2/3,沉默多靶点组分为4组并分别转染100 nmol·L-1siVEGFA+siVEGFR1、siVEGFA+siVEGFR2、siVEGFA+siVEGFR3及siVEGFR1+siVEGFR2+siVEGFR3,以小管形成实验检测各组HUVECs小管形成情况。结果 siVEGFA组、siVEGFR1组、siVEGFR2组与siVEGFR3组沉默效率分别为(85.67±10.50)%,(71.67±7.02)%,(89.00±11.36)%与(90.00±3.60)%,与空白及阴性对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。siVEGFA组血管总长度、分支管长度和血管交叉点分别为(32.67±3.79)%,(22.67±2.08)%及(25.33±6.43)%,在沉默单靶点组中抑制血管生成能力最强(均P<0.05);siVEGFA+siVEGFR3组血管总长度、分支管长度和血管交叉点分别为(28.33±5.51)%,(10.00±2.65)%,(8.33±2.31)%,siVEGFR1+siVEGFR2+siVEGFR3组分别为(27.00±4.00)%,(9.33±2.89)%,(10.00±3.60)%,在沉默多靶点组中抑制血管生成能力最强(均P<0.05)。结论 siRNAs沉默VEGF通路中单靶点的表达,可有效抑制HUVECs诱导的血管生成;同时沉默多靶点的表达,其抑制血管生成的功效更强。
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