人血清淀粉样蛋白P的分离,纯化及抗血清的制备 |
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引用本文: | 庞呈义,李祥安.人血清淀粉样蛋白P的分离,纯化及抗血清的制备[J].泰山医学院学报,1998,19(3):189-191. |
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作者姓名: | 庞呈义 李祥安 |
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作者单位: | Dept.of Biochemistry,Taian,Shandong 271000 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,国家优秀青年教师基金,国家教委归国留学基金,山东省教委基金 |
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摘 要: | 目的分离、纯化人血清淀粉样蛋白P(SerumamyloidP,SAP);利用新西兰大白兔制备抗血清。方法新鲜人血清200ml与等体积4%琼脂糖凝胶(Sepharose-4B)混合,在钙离子存在条件下分离SAP,然后用二乙基氨基乙基琼脂糖凝胶CL—6B(DEAE—SepharoseCL-6B)离子交换层析技术进一步纯化SAP,用火箭电泳检测SAP组分,用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodiumdodecylsulfate-Polyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE)检测其纯度,经A280(1%)=182测定其含量。用纯化的SAP与完全佐氏试剂混合注射于新西兰大白兔背部皮内,每次100μg,间隔10天,连续3次,第四次200μg,SAP总用量为500μg,10天后取血制备抗血清。结果从200ml人血清中提取纯品24mg,产率约40%。抗血清经双向扩散法测定效价为1:16。结论该改良法,操作简便,节省时间,但SAP产率并不低。
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关 键 词: | 血清淀粉样蛋白P 抗血清 离子交换层析 纯化 |
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