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锌指蛋白A20 RNAi腺病毒的制备及其对人脑胶质瘤细胞系U87细胞功能的影响
引用本文:郭庆东,张伟,王春梅,李兵,曹卫东,李侠,章翔. 锌指蛋白A20 RNAi腺病毒的制备及其对人脑胶质瘤细胞系U87细胞功能的影响[J]. 实用医学杂志, 2007, 23(9): 1278-1281
作者姓名:郭庆东  张伟  王春梅  李兵  曹卫东  李侠  章翔
作者单位:1. 710032,西安市,第四军医大学西京医院解放军神经外科研究所
2. 710032,西安市,第四军医大学基础部微生物学教研室
3. 710032,西安市,第四军医大学电子显微镜中心
摘    要:目的:进一步探讨A20与促进脑胶质瘤恶性增殖和抗细胞凋亡之间的关系,尝试今后在动物体内进行脑胶质瘤基因治疗的研究,通过构建针对A20基因的重组腺病毒干涉载体感染U87细胞系,观察其对细胞生存状态的影响。方法:在前期预实验的基础上构建对A20干涉效果最好的腺病毒干涉表达载体pSilencerTM adeno 1.0-CMV-A20R1,通过HEK-293细胞的包装后收获腺病毒并进行纯化,最后用此腺病毒再次感染人脑胶质母细胞瘤细胞U87,经RT-PCR、Western blot确认干涉效果;通过流式细胞术(FCM)观察A20表达抑制对U87细胞周期和细胞凋亡的影响。结果:完成了重组腺病毒干涉表达载体pSilencerTM adeno 1.0-CMV-A20R1在HEK-293细胞内的包装;对病毒进行纯化后获得了高滴度(1.1×1011pfu/mL)的感染病毒,将其感染U87细胞系后,RT-PCR和Westernblot结果证实U87细胞中A20mRNA和蛋白的表达均受到明显抑制;FCM结果也证实U87-A20R1细胞内凋亡细胞明显增多。结论:重组A20腺病毒干涉载体可很好地抑制U87细胞内A20的表达且能导致细胞凋亡,该研究结果为临床上用新思路治疗脑胶质瘤提供了实验依据。

关 键 词:神经胶质瘤  RNA结合蛋白质类  锌指  基因
修稿时间:2006-12-292007-01-25

Construction of A20 RNAi adenovirus vector and its effects on human glioma cell line U87
GUO Qing-dong,ZHANG Wei,WANG Chun-mei,LI Bing,CAO Wei-dong,LI Xia,ZHANG Xiang. Construction of A20 RNAi adenovirus vector and its effects on human glioma cell line U87[J]. The Journal of Practical Medicine, 2007, 23(9): 1278-1281
Authors:GUO Qing-dong  ZHANG Wei  WANG Chun-mei  LI Bing  CAO Wei-dong  LI Xia  ZHANG Xiang
Abstract:
Keywords:Glioma RNA-binding proteins Zinc fingers Genes
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